化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應緩沖液、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途,。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Bunostomum trigonocephalum |
貨號 | CP934005 |
產(chǎn)品特征:
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 ,。
重復性好：擴增曲線重合度高,，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低,，起峰快,，效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關產(chǎn)品：
鹽酸替來他明標準品犬胰島素(INS)ELISA Kit，48T/96T
替米考星標準品兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,，48T/96T
馬來酸噻嗎洛爾標準品牛乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit,，48T/96T
噻康唑標準品豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA Kit，48T/96T
噻康唑相關物質(zhì)A標準品大鼠Ⅰ型前膠原(PCⅠ)ELISA Kit,，48T/96T
噻康唑相關物質(zhì)B標準品人流感病A(FLU A)ELISA Kit,，48T/96T
噻康唑相關物質(zhì)C標準品人腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)ELISA Kit，48T/96T
妥布霉素標準品人瘦素受體(LEPR)ELISA Kit,，48T/96T
替硝唑標準品人可溶性腫瘤壞死因子受體1(sTNF-R1)ELISA Kit,，48T/96T
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒替硝唑相關物質(zhì)A標準品人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)ELISA Kit，48T/96T
替硝唑相關物質(zhì)B標準品人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA Kit,，48T/96T
鹽酸妥卡尼標準品人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二氧化鈦標準品人酸化酰輔酶A(PaCoA)ELISA Kit，48T/96T
DL-α-生育酚標準品人脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA Kit,，48T/96T
維生素E醋酸酯標準品人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA Kit,，48T/96T CD19 CD19抗體膽石酸
CD184/CXCR4 細胞表面趨化因子受體4抗體地蒽酚
CD177/NB1 嗜中性粒細胞抗原CD177抗體地塞米松
CD172a/SIRP Alpha 信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體東莨菪堿
CD171/NCAM-L1 神經(jīng)細胞粘附分子配體1抗體對苯磺酰胺
CD170/Siglec-5 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體對羥基苯酰胺
CD169/sialoadhesin 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素1抗體奮乃靜
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體酚磺胺
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體格列本脲
CD167b/DDR2 盤狀結(jié)構域受體蛋白2抗體10％A晶型苯咪唑
CD166 活化白細胞粘附分子抗體苯咪唑
CD163L1 CD163蛋白樣1抗體6-氧基-2-萘酮
CD163/M130 CD163抗體N-基
CD161c/NK1.1 CD161抗體卡馬西平
CD161 CD161抗體酸咯萘啶
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL,、200 µL,、1000 µL）、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.即開即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單,，定量準確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強,。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研