詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Bacteroides spp. |
貨號 | CP933941 |
產(chǎn)品特征:
擬桿菌屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,,抑制非特異性擴增 。
重復性好:擴增曲線重合度高,,受干擾影響少,。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,,效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,,就有一個熒光分子形成,,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是擬桿菌屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
利奈孕醇標準品小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit,,48T/96T
L-賴氨酸醋酸鹽標準品大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit,48T/96T
L-賴氨酸鹽酸鹽標準品人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
L-溶血卵脂標準品小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
油酸聚烴氧酯標準品大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
聚氧烯硬脂酸酯標準品兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA Kit,,48T/96T
醋酸磺胺米隆標準品人雌二醇受體(ER)ELISA Kit,48T/96T
鎂加鋁標準品小鼠雌二醇受體(ER)ELISA Kit,,48T/96T
碳酸鎂標準品豬雌二醇受體(ER)ELISA Kit,,48T/96T
化鎂標準品大鼠雌二醇受體(ER)ELISA Kit,48T/96T
氧化鎂標準品人補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T
酸鎂標準品小鼠補體蛋白4(C4)ELISA Kit,,48T/96T
水楊酸鎂標準品大鼠補體蛋白4(C4)ELISA Kit,,48T/96T
硬脂酸鎂標準品兔子補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T
馬拉硫標準品鮭魚補體蛋白4(C4)ELISA Kit,,48T/96T Donkey Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標記的驢抗豚鼠IgG富馬酸酮替芬雜質(zhì)Ⅰ
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗豚鼠IgG酸后馬托品
擬桿菌屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgG反式帕羅西汀
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標記的驢抗豚鼠IgG去氟帕羅西汀
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗豚鼠IgGN-基帕羅西汀
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Bio 生物素標記的驢抗豚鼠IgG4-羥基間苯二酸
Donkey Anti-Guinea pig IgG/APC APC標記的驢抗豚鼠IgG戊酸鎂
Donkey Anti-Guinea pig IgG/AP 堿性酸酶(AP)標記的驢抗豚鼠IgG二氧芐啶
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgG間酚
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG對酚
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的驢抗豚鼠IgG尼索地平雜質(zhì)Ⅱ
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG對氨基水楊酸鈉
Donkey Anti-Guinea pig IgG 驢抗豚鼠IgG華法林鈉
Donkey anti-Gpig IgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清N-(4-氟苯?;├野?/span>
Donkey Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的驢抗羊IgG磺胺吡啶
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡單,,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,,特異性強,。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果,。產(chǎn)品僅用于科研