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產(chǎn)品簡介
牛乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途,。
詳細(xì)介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL、200 µL,、1000 µL）,、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,，便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Bovine Papillomavirus(BoPV) |
貨號(hào) | CP933988 |
產(chǎn)品特征:
牛乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,，抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少,。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低,，起峰快，效率高,。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時(shí),，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí),，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，產(chǎn)品僅用于科研使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是牛乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
二類殘留溶-N,N-二基酰胺標(biāo)準(zhǔn)品小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-N,N-二基酰胺標(biāo)準(zhǔn)品大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-1,4-二惡烷標(biāo)準(zhǔn)品兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit，48T/96T
二類殘留溶-二醇標(biāo)準(zhǔn)品人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-酰胺標(biāo)準(zhǔn)品小鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-己烷標(biāo)準(zhǔn)品猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit，48T/96T
二類殘留溶-醇標(biāo)準(zhǔn)品豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-2-氧基醇標(biāo)準(zhǔn)品大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-氧基酮標(biāo)準(zhǔn)品兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit，48T/96T
二類殘留溶-六化苯標(biāo)準(zhǔn)品雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-N-基吡咯烷酮標(biāo)準(zhǔn)品人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
牛乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒二類殘留溶-硝基烷標(biāo)準(zhǔn)品小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T
二類殘留溶-吡啶標(biāo)準(zhǔn)品猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-環(huán)砜標(biāo)準(zhǔn)品豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,，48T/96T
二類殘留溶-四呋喃標(biāo)準(zhǔn)品大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T Chloroplast protease 葉綠體蛋白酶抗體（植物）利血平
Chloramphenicol 霉素抗體白楊素
Chloramphenicol 霉素抗體白楊素-6-C-葡萄糖基-8-C-阿拉伯糖甙
CHL1/CALL 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL抗體喜樹堿
CHKL/Ethanolamine kinase beta 醇胺激酶β抗體續(xù)隨二萜醇
CHK2 細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶2抗體千金子二萜醇
CHK1/CHEK1 細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1抗體龍腦
Chicken IgY 兔抗雞IgY抗體5-羥基糠醛
CHFR 泛素連接酶蛋白CHFR抗體β-胡蘿卜素
Chemerin/TIG2 視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體百秋李醇
CHDH/Choline dehydrogenase 膽堿脫酶抗體去木香內(nèi)酯
CHD3 ATP依賴的解旋酶CHD3抗體木香烴內(nèi)酯
CHCHD8 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體補(bǔ)骨脂素
CHCHD6 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體異補(bǔ)骨脂素
CHCHD6 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體肉桂酸