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產(chǎn)品簡介
雙芽巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途。
詳細介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制,，抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高,，受干擾影響少,。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快,，效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Babesia bigemina |
貨號 | CP933920 |
雙芽巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，產(chǎn)品僅用于科研報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL,、200 µL,、1000 µL）、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.即開即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單,，定量準確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強,。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,，便于分析試驗結(jié)果。
以下是雙芽巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
加替沙星標準品馬β內(nèi)肽(β-EP)ELISA Kit,，48T/96T
鹽酸吉西他濱標準品小鼠β內(nèi)肽(β-EP)ELISA Kit,，48T/96T
吉非羅齊標準品大鼠β內(nèi)肽(β-EP)ELISA Kit，48T/96T
吉非羅齊相關(guān)物質(zhì)A標準品人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,，48T/96T
染料木苷標準品小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,，48T/96T
金雀異黃素標準品大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit，48T/96T
龍膽紫標準品犬5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,，48T/96T
赤霉酸標準品人5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,，48T/96T
姜素混合物標準品小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA Kit，48T/96T
生姜粉標準品大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,，48T/96T
銀杏酸標準品人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA Kit,，48T/96T
銀杏內(nèi)酯標準品小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA Kit，48T/96T
花旗參精粉標準品大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA Kit,，48T/96T
亞洲人參提取物粉標準品人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA Kit,，48T/96T
羥基洋地黃甙標準品小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA Kit，48T/96T ERN2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體富馬酸福莫特羅
ERM/Etv5 轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體鹽酸吡格列酮
雙芽巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒ERK4 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶4抗體洛索洛芬鈉
ERK2/MAPK1 絲裂原活化蛋白激酶1抗體奈韋拉平
ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激酶3抗體碘普羅胺
ERK1/2(p44/42 MAPK) 絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體氨三醇
ERG25 基固醇羥化酶單加氧酶1抗體鹽酸替扎尼定
ERdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10蛋白抗體鹽酸替羅非班
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體（醇致畸因子）鹽酸莫索尼定
ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體消旋鹽酸替羅非班
ER-beta 雌激素受體β 抗體鹽酸哌維林
ErbB-3/HER3 表皮生長因子受體3抗體鹽酸多奈哌齊
ERAS/HRAS2 胚胎干細胞RAS蛋白抗體纈沙坦
ER-alpha/beta 雌激素受體α/β抗體鹽酸安普樂定
ER-Alpha 雌激素受體α抗體（用于western blot）阿可樂定