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產(chǎn)品簡介
駑巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途。
詳細介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL,、200 µL、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單,，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強,。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Babesia caballi |
貨號 | CP933922 |
產(chǎn)品特征:
駑巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 ,。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高,，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低,，起峰快,，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成,，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是駑巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
L-谷氨酸鹽酸鹽標準品兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA Kit，48T/96T
優(yōu)降糖標準品人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit,，48T/96T
優(yōu)降糖相關(guān)物質(zhì)A標準品小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit,，48T/96T
優(yōu)降糖相關(guān)物質(zhì)B標準品豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T
甘油標準品大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit,，48T/96T
甘油山崳酸酯標準品兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit,，48T/96T
甘油二硬脂酸酯標準品牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T
甘油單亞油酸酯標準品人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit,，48T/96T
甘油單油酸酯90％標準品小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit,，48T/96T
甘油單油酸酯40％標準品大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T
甘氨酸標準品牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,，48T/96T
黃豆黃素標準品人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,，48T/96T
黃豆黃甙標準品小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit，48T/96T
甘草酸標準品大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,，48T/96T
甘羅銨甘羅銨標準品人內(nèi)素(ET)ELISA Kit,，48T/96T Ephrin B Ephrin B抗體齊多夫定
駑巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒Ephrin A5 酪氨酸蛋白激酶A5受體抗體鹽酸羅格列酮
Ephrin A3/EFNA3 酪氨酸蛋白激酶A3受體抗體格列美脲
Ephrin A2/LERK6 Ephrin A2抗體格列美脲雜質(zhì)2
EphB6 酪氨酸蛋白激酶受體B6抗體苯馬隆
EPHB4 酪氨酸蛋白激酶受體B4抗體左羥
EphB2/Eph receptor B2 酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體美洛昔康
EphB2 R 酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體酰苯柳胺
EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體鹽酸布替奈芬
EphB1+EphB2 酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體消旋卡多曲
EphB1/Eph receptor B1 酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體鹽酸托烷司瓊
EphA8/Eph receptor A8 酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體利魯唑
EphA7/Eph receptor A7 酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體坎地沙坦酯
EphA6/Eph receptor A6 酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體鹽酸司他斯汀
EphA5/Eph receptor A5 酪氨酸蛋白激酶A5受體抗體鹽酸二弗林