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產(chǎn)品簡介
溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途,。
詳細介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL,、200 µL,、1000 µL）、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單,，定量準確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強,。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,，便于分析試驗結(jié)果,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Aeromonas sobria |
貨號 | CP933874 |
產(chǎn)品特征:
溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制,，抑制非特異性擴增 ,。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少,。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低,，起峰快，效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
卡巴胂標準品人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit,，48T/96T
羧芐西林茚滿鈉標準品小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit，48T/96T
一水合羧芐西林鈉標準品大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit,，48T/96T
卡比多巴標準品人種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit,，48T/96T
卡比多巴相關(guān)物質(zhì)A標準品小鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit，48T/96T
馬來酸卡比沙明標準品裸鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit,，48T/96T
卡鉑標準品大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit,，48T/96T
卡前列素氨三醇標準品人卵巢癌標志物CA125ELISA Kit，48T/96T
羧基纖維素鈣標準品小鼠卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,，48T/96T
羧基纖維素鈉標準品大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,，48T/96T
卡立普多標準品人乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit，48T/96T
溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒羧基纖維素標準品小鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit,，48T/96T
卡維地洛標準品大鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit,，48T/96T
卡維地洛相關(guān)物質(zhì)A標準品人胃腸癌標志物CA199ELISA Kit，48T/96T
卡維地洛相關(guān)物質(zhì)B標準品小鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit，48T/96T Goat anti-Mouse IgG whole serum 羊抗小鼠IgG抗血清杜鵑素
Coconut lethal yellowing phytoplasma椰子致死黃化植原體PCR試劑盒
Coconut Tinangaja Viroid(CTiVd)椰子敗生類病毒RT-PCR試劑盒
Colletotrichum kahawae咖啡漿果炭疽病菌PCR試劑盒
Cotton Leaf Crumple Virus(CLCrV)棉花皺葉病毒PCR試劑盒
Cotton Leaf Curl Virus(CLCuV)棉花曲葉病毒PCR試劑盒
Cowpea Mild Mottle Virus(CPMMV)豇豆輕斑病毒RT-PCR試劑盒
Cowpea Severe Mosaic Virus(CPSMV)豇豆重花葉病毒RT-PCR試劑盒
Crinipellis perniciosa可可叢枝病菌PCR試劑盒
Cronartium coleosporioides油松皰銹病菌PCR試劑盒
Cronartium comandrae北美松皰銹病菌PCR試劑盒
Cronartium conigenum松球果銹病菌PCR試劑盒
Cronartium fusiforme松紡錘瘤銹病菌PCR試劑盒
Cronartium ribicola松皰銹病菌PCR試劑盒
Cryphonectria cubensis桉樹潰瘍病菌PCR試劑盒
Cucumber Green Mottle Mosaic Virus(CGMMV)黃瓜綠斑駁花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cucumber Mosaic Virus(CMV)黃瓜花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cucurbit Yellow Stunting Disorder V(CYSDV)葫蘆黃色矮化失調(diào)病毒PCR試劑盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens菜豆細菌性萎蔫病菌PCR試劑盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. oortii郁金香黃色皰斑病菌PCR試劑盒
Cylindrocladium parasiticum花生黑腐病菌PCR試劑盒
Cymbidium Mosaic Virus(CymMV)蘭花花葉病毒RT-PCR試劑盒
Cymbidium Ringspot Virus(CymRSV)蘭花環(huán)斑病毒PCR試劑盒
Diaporthe helianthi向日葵莖潰瘍病菌PCR試劑盒
Diaporthe perniciosa蘋果果腐病菌PCR試劑盒
Diaporthe phaseolorum大豆莖潰瘍病菌PCR試劑盒