大鼠晶狀體組織提取物現(xiàn)貨供應(yīng),，質(zhì)量有保證,、*、實(shí)驗(yàn)效果好,，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書,、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時(shí)電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué),、免疫學(xué)、腫瘤學(xué),、生物化學(xué),、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 適用的對(duì)象范圍廣,，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,。

晶狀體組織位于玻璃體前側(cè)呈雙凸透鏡狀,，晶體是眼球屈光系統(tǒng)的重要組成部分,，也是具有調(diào)節(jié)能力的屈光間質(zhì),。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠晶狀體組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片,、OD值測(cè)定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠晶狀體組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序,；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。

產(chǎn)品名稱	大鼠晶狀體組織提取物
英文名稱	Eye: Normal Rat Lens Derivatives
貨號(hào)	CS-X4013

 

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號(hào)16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride(TCEP) 三（2-羰基基）鹽鹽 DL-檸檬內(nèi)酯

Giemsa stain 吉姆薩色素染料D-古洛糖-γ-內(nèi)酯

Giemsa stain 吉姆薩色素染料D-葡糖醛內(nèi)酯

Fluorescein Sodium Salt 熒光素鈉  sigmaL-(+)-酒石二酯

Emodin 大黃素L-2-氨基-3-羥基 3-酯

Spironolactone 螺內(nèi)酯L-β,γ-二豆蔻酰-α-腦酯

Apigenin 芹菜素L-β,γ-二油酰-α-卵酯

Stanolone 二睪/雄諾龍L-β,γ-二棕櫚酰-α-腦酯

Luminol 魯米諾L-谷氨5-酯

Luminol 魯米諾L-酒石二酯
大鼠晶狀體組織提取物人可溶性凋亡相關(guān)因子配體elisa試盒≥4265% as determined by SDS-PAGE 2,4-二氯苯

人可溶性蛋白185elisa試盒≥4266% as determined by SDS-PAGE 2-苯基腈

人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3elisa試盒≥4267% as determined by SDS-PAGE 芐磺酰氯

人可溶性白細(xì)胞抗原Gelisa試盒≥4268% as determined by SDS-PAGE 1--2,，6-二氯苯

人可溶性E選擇素elisa試盒≥4269% as determined by SDS-PAGE 2-氟-3-基-5-硝基吡啶

人可溶性CD86elisa試盒≥4270% as determined by SDS-PAGE 三(三新戊基)酯

人可溶性CD40配體elisa試盒≥4271% as determined by SDS-PAGE D-(+)-二對(duì)氧基苯酰酒石

人可溶性CD38elisa試盒≥4272% as determined by SDS-PAGE 2-氯-5-碘苯

人可溶性CD30配體elisa試盒≥4273% as determined by SDS-PAGE 3,，6-二氯-4-基噠嗪

人可溶性CD28elisa試盒≥4274% as determined by SDS-PAGE 對(duì)氯叔基醚

人可溶性CD21elisa試盒≥4275% as determined by SDS-PAGE 4-氧基苯酚

人顆粒溶素elisa試盒≥4276% as determined by SDS-PAGE 4--2-噻吩醛

人顆粒酶Belisa試盒≥4277% as determined by SDS-PAGE 3-苯

人顆粒酶Aelisa試盒≥4278% as determined by SDS-PAGE 3-氨基芐醇

人柯薩奇病IgMelisa試盒≥4279% as determined by SDS-PAGE 3-氯桂

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，進(jìn)口來(lái)源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。