詳細(xì)介紹
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,,干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,,還是復(fù)蘇沒操作好,;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細(xì)胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
前列腺是雄性*的性腺器官,位于膀胱與原生殖膈之間。前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮,,由腺組織和肌組織構(gòu)成,。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠前列腺組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈,,蛋白質(zhì)及其亞組分,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量、電泳照片,、OD值測定結(jié)果等,。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠前列腺組織裂解液,,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,,-80度保存。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序,;<4> Western and Northern Blot,;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Prostate: Normal Mouse Prostate Derivatives |
貨號 | CS-X3950 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時,,可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號16000-044),,15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
n-Octanoic acid 正辛 AR, 99% 二醛檢測試盒
Potassium Acetate 鉀氨轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶檢測試盒
Pyruvic acid 別孕烯醇/3α,5α-四孕檢測試盒
Ferrocenemethanol 羥基二茂鐵表皮細(xì)胞活化肽因子檢測試盒
2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT)2,6-二叔基對酚表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7檢測試盒
2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT)2,6-二叔基對酚表皮生長因子受體2檢測試盒
Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin 羥基-β-環(huán)糊精表皮生長因子受體檢測試盒
Methyl-β-cyclodextrin 基-β-環(huán)糊精/2,6-二基-β-環(huán)糊精表皮生長因子檢測試盒
N-Ethylmaleimide N-基順烯二酰亞胺(NEM)表睪ELISA試盒
PyBOP 六氟苯并三唑-1-基-氧基三吡咯基表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型腫瘤抗原檢測試盒
小鼠前列腺組織提取物人腎上腺髓質(zhì)素elisa試盒重水,氧化氘(50G)
人CC趨化因子受體1elisa試盒重水,氧化氘(100G)
人C4結(jié)合蛋白elisa試盒銨,醋銨(色譜級)
人B因子elisa試盒氘代(0.55 ml x 10)
人B細(xì)胞受體elisa試盒氘代(50g )
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2elisa試盒氘代(100g )
人B細(xì)胞連接蛋白elisa試盒氘代腈(10g )
人B細(xì)胞活化因子受體elisa試盒氘代腈(0.5 mL x 10 )
人B細(xì)胞分化因子elisa試盒氘代腈(0.5 mL x 10 )
人嗜性白球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3elisa試盒氘代腈(10 mL )
人嗜性白球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2elisa試盒氘代腈(25 mL )
人嗜性白球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1elisa試盒氘代腈(25g )
人嗜性白球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12elisa試盒氘代腈(50g )
人嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白elisa試盒氘代苯(5 g )
人受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激酶2elisa試盒氘代苯(10 g )