詳細(xì)介紹
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,,很難說是細(xì)胞自身不行,,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
脂肪組織是體內(nèi)貯存能量的倉庫,主要提供熱能;保護(hù)內(nèi)臟,,維持體溫;協(xié)助脂溶性維生素的吸收;參與機(jī)體各方面的代謝活動(dòng)等等,。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠皮下脂肪組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈,,蛋白質(zhì)及其亞組分,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等,。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠皮下脂肪組織裂解液,,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,,-80度保存。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序,;<4> Western and Northern Blot,;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Fat: Normal Mouse Subcutaneous Fat Derivatives |
貨號(hào) | CS-X3957 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),,可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),,85%;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,,貨號(hào)16000-044),15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
Lidocaine 利多卡因白介素23受體檢測(cè)試盒
Agomelatine 阿戈美拉汀白介素23A檢測(cè)試盒
D(-)-Salicin 水楊苷(水楊素)白介素23檢測(cè)試盒
D(-)-Salicin 水楊苷(水楊素)白介素22檢測(cè)試盒
Shikimic acid 莽草白介素-21檢測(cè)試盒
Sodium Cyclamate 甜蜜素白介素20檢測(cè)試盒
Carmine 洋紅白介素2檢測(cè)試盒
Sildenafil 西地那非 白介素2檢測(cè)試盒
Sildenafil 西地那非 白介素1受體樣1檢測(cè)試盒
Chitin 幾質(zhì) 殼多糖 白介素1受體相關(guān)激酶-4檢測(cè)試盒
小鼠皮下脂肪組織提取物人未化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1elisa試盒醇(色譜級(jí))
人胃泌素釋放多肽elisa試盒二醇醚(色譜級(jí))
人胃泌素elisa試盒醇(色譜級(jí))
人胃蛋白酶elisa試盒酯(色譜級(jí))
人胃腸癌標(biāo)志物CA199elisa試盒二醇醚酯(色譜級(jí))
人胃癌標(biāo)志物elisa試盒戊(色譜級(jí))
人維生素K1elisa試盒醇(色譜級(jí))
人維生素Eelisa試盒對(duì)硝基苯酰氯(色譜級(jí))
人維生素D受體elisa試盒硝基(色譜級(jí))
人維生素Delisa試盒正辛(色譜級(jí))
人維生素D結(jié)合蛋白elisa試盒2-戊(色譜級(jí))
人維生素D3elisa試盒3-戊(色譜級(jí))
人維生素D2elisa試盒正醇(色譜級(jí))
人維生素Celisa試盒正戊(色譜級(jí))
人維生素B12elisa試盒石油醚(色譜級(jí))