細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué),、免疫學(xué),、腫瘤學(xué)、生物化學(xué),、遺傳學(xué),、分子生物學(xué)等； 適用的對象范圍廣,，從低等動物到高等動物,，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量,、同一時期、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實驗對象,。

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，由人類乳頭瘤病毒（HumanPapillomavirus,，簡稱HPV）引起的,，按病理組織學(xué)主要分為腺癌、腺角化癌和鱗狀細胞癌,。公司科技提供來自新鮮或冷凍人宮頸癌組織中高質(zhì)量的總RNA,，PCR準備的條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分,。這些臨床定義的人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人體宮頸癌組織裂解液,，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序,；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜,。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

QualitativeGypenoside XLVI,；絞股藍皂苷XLVI黑色素細胞抗體檢測試盒

0.188μg/mlButyl paraben,；對羥基苯酯黑色素濃縮激素檢測試盒

0.094ng/ml2-Acetylacteoside；2-?；笙惴榆?黑色素瘤相關(guān)抗原D4檢測試盒

0.094ng/mlOphiopogonin D,；麥冬皂苷D黑色素瘤活性抑制蛋白檢測試盒

Pyriproxifen；吡醚黑色素瘤標(biāo)記物檢測試盒

Isoliquiritigenin,；甘草素黑色素瘤ELISA試盒

Salvianolic acid A,；丹酚A黑色素ELISA試盒

Momordin Ic；地膚子皂苷Ic核因子κB抑制物激酶β檢測試盒

Jatrorrhizine Hydrochloride,；鹽藥根核因子κB抑制物激酶α檢測試盒

2,4-Di-tert-butylphenol,；2,4-二叔基酚核因子κB檢測試盒
人體宮頸癌組織提取物人二酯酶4D(PDE4D)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒1-辛磺鈉(>98%,BC )

人腦型肌激酶(CKB)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒 2,3,5三碘苯(>97%,植物激素級)

人抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKM-1 IgG)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒3-吲哚鉀(>98%,植物激素級)

人氨酰氧化酶樣蛋白4(LOXL4)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒鈣一水(>98%,BR)

人腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒三鈣(>98%,BR)

人抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒DL-硒代蛋氨(USP)

人殺菌肽LL-37(LL-37)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒蜜二糖

人胸腺肽α1(Tα1)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒草鈉(>98%,，BC)

人早老素1(PS1)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒 鎢鈉二水(>98%,BR)

人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽38(PACAP-38)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒 二酐(>98%,BR)

人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽27(PACAP-27)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒四基氯化銨(>98%,BR)

人白介素35(IL-35)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒吐溫60

人可溶性胸苷激酶1(TK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒苯噻嗪;賽拉嗪

人12脂加氧酶(12-LO)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒 酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)

人絨毛蛋白1(VIL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試盒 3,5-二硝基苯(>98%,BR)

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。