細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),，進(jìn)口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。

睪丸位于內(nèi),，左右各一,，一般左側(cè)略低于右側(cè)1cm。睪丸呈微扁的橢圓形,，表面光滑,，分內(nèi)、外側(cè)兩面,，前,、后兩緣和上、下兩端,。其前緣游離,；后緣有血管、神經(jīng)和淋巴管出入,，并與附睪和輸精管的睪丸部相接觸,。公司科技提供來自新鮮或冷凍人睪丸支持組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈,，蛋白質(zhì)及其亞組分,。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng),。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人睪丸支持組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序,；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號(hào)16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品：

0.469ng/mlSinigrin,；黑介子苷前列腺素E2檢測(cè)試盒

0.188ng/mlGlycitin；黃豆黃苷前列腺素E1檢測(cè)試盒

46.875pg/mlEthyl ferulate,；阿魏酯前列腺素D合成酶檢測(cè)試盒

0.188ng/mlCapsaicin,；辣椒前列腺素D2檢測(cè)試盒

0.094ng/mlGlycitein；黃豆黃素前列腺素A1檢測(cè)試盒

9.375pg/mlTimosaponin A3,；知母皂苷A3前列環(huán)素檢測(cè)試盒

9.375pg/mlMemantine HCl,；鹽美金剛前顆粒蛋白檢測(cè)試盒

9.375pg/mlStachydrine hydrochlori；鹽水蘇前膠原C內(nèi)肽酶增強(qiáng)子1檢測(cè)試盒

0.188ng/mlChitotriose 3HCl,；殼三糖前膠原C端肽酶檢測(cè)試盒

1.875ng/mlChitohexaose 6HCl,；殼六糖前動(dòng)力蛋白1檢測(cè)試盒
人睪丸支持組織提取物小板衍生生長(zhǎng)因子B(PDGFB)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)吲哚-3-酯

管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)東莨菪(標(biāo)準(zhǔn)品)

叉頭框蛋白M1(FOXM1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)脫氧膽鈉；去氧膽鈉

神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)?；切苋パ跄?/span>

神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)?；切苋パ跄戔c

膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)7-苯基氨基酰基庚

表皮調(diào)節(jié)素(EREG)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)新生鈉鹽

神經(jīng)纖維素2(NF2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磺胺基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)

心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)井岡

頂體蛋白(ACR)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)腐草

精子蛋白17(Sp17)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)光神,光輝A

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)寡

管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)紡錘菌素

Toll樣受體7(TLR7)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)頭孢菌素C鋅鹽

Toll樣受體7(TLR7)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)細(xì)胞松弛素B