大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物現(xiàn)貨供應(yīng),，質(zhì)量有保證,、*,、實(shí)驗(yàn)效果好,，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū),、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號(hào)16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物是從大鼠原代子宮平滑肌細(xì)胞提取的,，大鼠原代子宮平滑肌細(xì)胞從正常大鼠子宮組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量、電泳照片,、OD值測(cè)定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠子宮平滑肌組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

產(chǎn)品名稱(chēng)	大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物
英文名稱(chēng)	Rat Uterus: Normal Uterus Derivatives
貨號(hào)	CS-X3773

 

細(xì)胞分類(lèi)：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過(guò)后，T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù),，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于A(yíng)TCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買(mǎi)到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，進(jìn)口來(lái)源，保證5代以?xún)?nèi),，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷(xiāo)售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.094ng/ml頭孢哌/舒巴坦藥敏實(shí)驗(yàn)紙片 SCF 105ug人激酶A錨定蛋白17A(AKAP-17A)ELISA試盒

46.9pg/ml頭孢噻呋 EFT 30ug人載脂蛋白A-I結(jié)合蛋白(AI-BP)ELISA試盒

0.469ng/ml1，1-二苯基-2-三硝基苯肼 DPPH人載脂蛋白L1(Apolipoprotein L1)ELISA試盒

0.188ng/ml膠回收kit  瓊脂糖凝膠回收試盒人多藥耐藥相關(guān)蛋白4(MRP4)ELISA試盒

46.9pg/mlDMSO二基亞砜（細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)）人多藥耐藥相關(guān)蛋白6(MRP6)ELISA試盒

0.094ng/mlPCR純化Kit人多藥耐藥相關(guān)蛋白9(MRP9)ELISA試盒

0.094ng/ml質(zhì)粒提取試盒人多藥耐藥蛋白3(MDR3)ELISA試盒

9.375pg/mlFreund 's Adjuvant Incomplete 弗氏不*佐人ATP-結(jié)合盒亞家族B成員5 (ABCB5)ELISA試盒

46.9pg/mlFreund 's Adjuvant Complete 弗氏*佐人果糖-二醛縮酶C(ALDOC)ELISA試盒

0.188ng/mlHT（原裝）人精氨基琥珀合成酶(Argininosuccinate synthase)ELISA試盒
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-亮氨

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-氨鹽鹽

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-蛋氨

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)索非布韋

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-鳥(niǎo)氨鹽鹽

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-苯氨叔酯鹽鹽

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-脯氨

白介素10(IL10)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)頭孢脒,；先鋒18號(hào)

白介素10(IL10)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-絲氨

白介素10(IL10)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-絲氨酯鹽鹽

白介素11(IL11)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-蘇氨

白介素11(IL11)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-色氨酯鹽鹽

白介素12B(IL12B)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)N-酰-D-色氨

白介素12A(IL12A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-酪氨酯鹽鹽

白介素12A(IL12A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2'-氧基腺;2'-O-基腺苷