細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué),、免疫學(xué),、腫瘤學(xué)、生物化學(xué),、遺傳學(xué),、分子生物學(xué)等； 適用的對象范圍廣,，從低等動物到高等動物,，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量,、同一時期、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實驗對象,。

大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物是從大鼠原代嗅鞘細(xì)胞提取的，大鼠原代嗅鞘細(xì)胞從正常大鼠腦組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng),。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠嗅鞘組織裂解液，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測序,；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.469ng/mlBirch-Me,；水楊酯人Apelin(APLN)Polyclonal Antibody

0.469ng/mlMeropenem trihydrate；美羅培南人水通道蛋白9(AQP9)Polyclonal Antibody

0.188ng/mlMeropenem trihydrate,；美羅培南人重組醛糖還原酶(AKR1B1)Polyclonal Antibody

0.094ng/mlMeropenem trihydrate,；美羅培南三水人脂聯(lián)素受體蛋白1 Polyclonal Antibody

18.75pg/mlHydrocoumarin；二香豆素人胰腺α淀粉酶Polyclonal Antibody

75pg/mlGatifloxacin,；加替沙星人的載脂蛋白M(APOM)Polyclonal Antibody

0.188ng/mlDexamethasone Acetate,；醋地塞米松人的載脂蛋白D(APOD)Polyclonal Antibody

0.188ng/mlTopotecan hydrochloride；鹽拓?fù)涮婵等烁蓴_素可誘導(dǎo)蛋白AIM2 Polyclonal Antibody

1.875ng/ml7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin,；7-基-10-羥基喜樹人金屬肽酶含小板反應(yīng)蛋白5(ADAM-TS 5)Polyclonal Antibody

18.75pg/mlScoparone,；濱蒿內(nèi)酯人δ氨基酰脫水酶(ALAD)Polyclonal Antibody
大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物肌紅蛋白(MYO)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)依萊鉻紅B

內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)固紅RL

內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)固紅紫色LB鹽

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)莧菜紅

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,性紅18

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酚藏花紅

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)天狼星玫紅,，BB

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)釕紅

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)藻紅B,四碘熒光素

氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)性紅88

氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)性紅183

D-二聚體(D2D)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)性紅9

蛋白激酶D1(PRKD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孔雀石綠

鐵蛋白(FE)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)燦爛綠,亮綠

淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)基綠

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。