細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。

大鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物是從大鼠原代皮下脂肪細(xì)胞提取的，大鼠原代皮下脂肪細(xì)胞從正常大鼠脂肪組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng),。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠皮下脂肪組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測序,；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達圖譜,。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.094ng/ml袋裝吸頭  '200ul黃色吸頭，斜嘴,，未滅菌,，袋裝 1000/包,  20包/箱人α紅蛋白穩(wěn)定蛋白(AHSP)Polyclonal Antibody

0.094ng/ml盒裝無菌吸頭  200ul 盒裝滅菌黃吸頭,96支/盒,10盒/大盒，5大盒/箱人蛋白激酶Bα(PKBα)Polyclonal Antibody

0.094ng/ml吸頭(短)  0.5-10ul透吸頭,，滅菌,，袋裝 1000/包, 20包/箱人和肽素(CPP)Polyclonal Antibody

2.813ng/ml盒裝無菌吸頭  '0.5-10ul盒裝滅菌透吸頭,96支/盒,10盒/大盒，5大盒/箱人膜聯(lián)蛋白-A3 Polyclonal Antibody

0.469ng/ml吸頭 300UL透吸頭   '300ul細(xì)嘴透吸頭,，袋裝 1000Tips/包,  10包/箱人膜聯(lián)蛋白A1( Annexin A1)Polyclonal Antibody

46.9pg/ml吸頭(長)    '0.5-20ul透吸頭,，袋裝   1000Tips/包,  20包/箱人載脂蛋白H(APOH)Polyclonal Antibody

0.094ng/ml袋裝濾芯吸頭   '1000ul透濾芯吸頭，袋裝  1000Tips /包, 5包/箱人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)Polyclonal Antibody

46.9pg/ml盒裝無菌濾芯吸頭   '1000ul盒裝滅菌透濾芯吸頭,100支/盒,10盒/大盒,，5大盒/箱人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)Polyclonal Antibody

46.9pg/ml袋裝濾芯吸頭   '200ul透濾芯吸頭,，袋裝  000Tips/包, 10包/箱人載脂蛋白C1(APO-C1)Polyclonal Antibody

0.094ng/ml盒裝無菌濾芯吸頭  '200ul 盒裝滅菌透濾芯吸頭,96支/盒,10盒/大盒，5大盒/箱人Atonal蛋白的同源蛋白1(ATOH1)ELISA 試盒
大鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物核糖核酶T2(RNASET2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Tris,三羥基氨基;氨三醇;緩銨

核糖核酶T2(RNASET2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-(叔氧羰基)醇胺

胎盤生長因子(PLGF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)L-亮氨醇

調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達分泌因子(RANTES)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)L-亮氨醇

CD30配體(CD30L)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-Boc-L-亮氨醇

CD30配體(CD30L)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)L-苯氨醇

CD40配體(CD40L)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)L-色氨醇

CD40配體(CD40L)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Fmoc-纈氨醇

干細(xì)胞因子(SCF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)D-纈氨醇

干細(xì)胞因子(SCF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)L-苯甘氨醇

干細(xì)胞因子(SCF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)BOC-L-脯氨醇

干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氨基醛縮二醇

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)絲氨醇,2-氨基-1,3-二醇

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-基-D-天門冬氨

轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)APMSF(進分)