大鼠卵巢成纖維細(xì)胞提取物現(xiàn)貨供應(yīng),，質(zhì)量有保證,、*,、實(shí)驗(yàn)效果好,，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū),、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過(guò)后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，進(jìn)口來(lái)源,，保證5代以內(nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。

大鼠卵巢成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠原代卵巢成纖維細(xì)胞提取的,，大鼠原代卵巢成纖維細(xì)胞從正常大鼠卵巢組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng),。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠卵巢成纖維組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

產(chǎn)品名稱	大鼠卵巢成纖維細(xì)胞提取物
英文名稱	Rat Ovaries: Normal Ovaries Derivatives
貨號(hào)	CS-X3769

 

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號(hào)16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

46.9pg/ml青藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） P 10ug人DNA(無(wú)嘌呤/無(wú)嘧啶基位點(diǎn))裂解酶（APEX1）CLIA試盒

46.9pg/ml多粘菌素B PB 300ug人膜聯(lián)蛋白-A2(Anxa2)CLIA試盒

1.875ng/ml鏈 S 10ug人抗頂體蛋白抗體(ACR)CLIA試盒

18.75pg/ml磺胺惡唑/氧芐啶藥敏實(shí)驗(yàn)紙片 SXT 25ug人管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)CLIA試盒

46.9pg/ml四環(huán)素藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） TE 30ug人蛋白聚糖核心蛋白(Aggrecan core protein)CLIA試盒

0.094ng/ml妥布 TOB 10ug人管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)CLIA試盒

46.875pg/ml萬(wàn)古藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） VA 30ug人Apelin 13(APLN13)CLIA試盒

0.469ng/ml頭孢拉定藥敏紙片人載脂蛋白C3(Apo-C3)CLIA試盒

9.375pg/ml克林藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） DA 2ug人Apelin 36(AP36)CLIA試盒

46.9pg/ml氧芐嘧啶藥敏紙片人載脂蛋白A5(apo-A5)CLIA試盒
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞提取物金屬蛋白2(MT2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)S-酰半胱氨鹽

微管蛋白β(TUBβ)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)O-叔基-L-蘇氨酯鹽鹽

G組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPG)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-氨酯鹽鹽

乳脫酶(LDH)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-精氨叔酯二鹽鹽

白介素15(IL15)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-天冬酰胺酯鹽鹽

CD3d分子(CD3d)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-天冬氨二叔基酯鹽鹽

CD19分子(CD19)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-谷氨酰胺叔酯鹽鹽

癌胚抗原(CEA)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-谷氨-5-叔酯-1-酯鹽鹽

CD3d分子(CD3d)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)N-芐基甘氨鹽鹽

凝因子Ⅶ(F7)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)甘氨芐酯鹽鹽

角蛋白13(KRT13)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-亮氨烯酯對(duì)基苯磺鹽

白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-亮氨叔酯鹽鹽

高遷移率族核小體結(jié)合域蛋白1(HMGN1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-氨酯二鹽鹽

叉頭框蛋白P3(FOXP3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-氨酯鹽鹽

• 乳脫酶(LDH)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)L-蛋氨酯鹽鹽