詳細介紹
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進口來源,保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。
大鼠膀胱成纖維細胞提取物是從大鼠原代膀胱成纖維細胞提取的,,大鼠原代膀胱成纖維細胞從正常大鼠膀胱組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應,。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備大鼠膀胱成纖維組織裂解液,離心去除組織碎片,,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存,。
潛在的應用: <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,;<3>基因克隆與目標測序,;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學,;<6>芯片研究與表達圖譜,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Rat Bladder:Normal Bladder Derivatives |
貨號 | CS-X3744 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%,;北美胎牛血清(United States,GIBCO,,貨號16000-044),,15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品:
3.75pg/mlNisin 乳鏈球菌肽PUC19 DNA/MSPI (HPAII) MARKER
0.469ng/mlCefsulodin Sodium Salt Hydrate 頭孢磺吡芐鈉鹽水合物PUC19 DNA/MSPI (HPAII) MARKER
0.094ng/mlDaunorubicin HCl 鹽柔紅PUC19 DNA/MSPI(HPAII), Ready-to-use
0.094ng/mlAbamectin 阿維菌素GENERULER 100BP DNA LADDER
0.188ng/mlAbamectin 阿維菌素GENERULER 100BP DNA LADDER
0.094ng/mlAmoxicillin 阿莫西林GENERULER 100BP DNA LADDER,Ready-to-use
18.75pg/mlAmoxicillin 阿莫西林GENERULER 100BP DNA LADDER,Ready-to-use
0.469ng/mlAmoxicillin 阿莫西林三水/羥氨芐青PHIX174 DNA/BSURI(HAEIII) marker
0.469ng/mlAmphotericin B solubilized 可溶性兩性B PHIX174 DNA/BSURI(HAEIII) marker
0.469ng/mlAmphotericin B solubilized 可溶性兩性BPHIX174 DNA/BSURI(HAEIII) marker, ready-to-use
大鼠膀胱成纖維細胞提取物白介素2受體β(IL2Rβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)曲拉通X-405
白介素2受體β(IL2Rβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)胍
白介素2受體β(IL2Rβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)CHAPS;3-[3-(膽酰胺基)二氨基]-1-磺
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)CHAPSO,;3-[(3-膽固醇氨基)二基氨基]-2-羥基-1-磺
熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二赤蘚醇(DTE);1,4-二代赤蘚醇
熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-硝基-L-精氨酯
白介素18(IL18)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-苯酰-L-酪氨酯(BTEE)
干擾素α(IFNα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)AEBSF絲氨抑制
抗載脂蛋白抗體(AAHA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)AEBSF(進分)
淋巴細胞胞漿蛋白2(LCP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽貝他定(進口)
T-細胞激活連接蛋白(LAT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鄰菲啰啉鹽鹽,,一水
蛋白酪氨酶受體H(PTPRH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)膦酰二肽鈉
神經(jīng)氨酶(NEU)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷
原鈣黏素α1(PCDHα1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)德羅特韋(GSK-1349572,DTG)
酯酶Cγ1(PLCγ1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)十二基吡喃葡萄糖苷,;月桂?;咸烟?/span>