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小鼠小腦顆粒細胞提取物

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更新時間:2020-07-06 11:10:34瀏覽次數(shù):571

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
貨號 CS-X3712 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
小鼠小腦顆粒細胞提取物現(xiàn)貨供應,,質量有保證,、*,、實驗效果好,,我司為您提供免費代測服務,,同時提供價格,、說明書、規(guī)格,、用途,、實驗原理等相關操作說明。

詳細介紹

細胞分類:

一種:
是凍存產(chǎn)品,,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,,還是復蘇沒操作好,;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,,只需加25元運費(順豐),。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進口來源,,保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。

小鼠小腦顆粒細胞提取物是從小鼠原代小腦顆粒細胞提取的,,小鼠原代小腦顆粒細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結果等,。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,,保證了產(chǎn)品的質量,。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠小腦顆粒組織裂解液,離心去除組織碎片,,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存,。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,;<3>基因克隆與目標測序,;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學,;<6>芯片研究與表達圖譜,。

產(chǎn)品名稱

 小鼠小腦顆粒細胞提取物

英文名稱

Mouse Brain: Normal Cerebellar Granule Cells Derivatives

貨號

CS-X3712

 


細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號16000-044),,15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品: 

0.281ng/ml無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST BSEMI

 9.4pg/ml無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST MBII

0.094ng/ml無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST PAGI

46.9pg/ml無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST TATI

0.938pg/ml無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST XAGI

9.375pg/ml無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST BPLI

9.375pg/ml含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST PSYI

4.69pg/ml酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST MSSI

46.875pg/mlX-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST TASI

18.75pg/mlX-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTDIGEST TAAI
小鼠小腦顆粒細胞提取物蛋白酪氨激酶2β(PTK2β)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)五氟苯基二基氯硅(>95.0%(GC))

腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)五氟苯二硅基二胺(>98.0%(GC)(T))

腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二基縮醛(>95.0%(GC))

多巴胺受體D1(DRD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二縮醛(>90.0%(T))

多巴胺受體D1(DRD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二縮醛(>98.0%(GC)(T))

Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺-二叔縮醛(>98.0%(N))

鈣調(diào)酶(CaN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二縮醛(0.5mL×10)

鈣調(diào)結合蛋白(CALD)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二新戊基縮醛(>95.0%(GC))

神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N,N-二基酰胺二基縮醛(>98.0%(GC))

生長關聯(lián)蛋白43(GAP43)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-芐基-3-對苯基三烯(>98.0%(T))

肌腱蛋白R(TNR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-基-3-對苯三烯(>98.0%(HPLC)(T))

微管關聯(lián)蛋白2(MAP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯基三基氧化銨(20-25%的醇溶液)

黑色素瘤關聯(lián)ME20(ME20M)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基氧化銨(10%的醇溶液)

套膜蛋白(iNV)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氧化三锍(0.2mol/L的醇溶液)

鳥氨脫羧酶(ODC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三氯化硼-醇試(5-10%)(1mL×10)

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