細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,，如細胞學,、免疫學、腫瘤學,、生物化學,、遺傳學、分子生物學等,； 適用的對象范圍廣,，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織,，都可進行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期,、重復性好的,、生物學性狀相似的實驗對象。

小鼠腸巨噬細胞提取物是從小鼠原代腸巨噬細胞提取的,，小鼠原代腸巨噬細胞從正常小鼠腸組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應10min 后終止RT反應,。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應,。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠腸巨噬組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學,；<6>芯片研究與表達圖譜。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

18.75pg/mlPDGFA關(guān)聯(lián)蛋白1(PDAP1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)TRU1I (MSEI)

0.094ng/ml PDGFA關(guān)聯(lián)蛋白1(PDAP1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)TRU1I (MSEI)

7.5pg/mlPDGFA關(guān)聯(lián)蛋白1(PDAP1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)TRU1I (MSEI), HC

46.875pg/ml小斑型POZ蛋白(SPOP)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)AATII

0.188ng/ml小斑型POZ蛋白(SPOP)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)AATII

9.375pg/ml小斑型POZ蛋白(SPOP)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSHNI (BANI)

0.094ng/ml正輔因子4(PC4)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BPII (BBSI)

3.75pg/ml正輔因子4(PC4)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BPII (BBSI)

0.188ng/ml正輔因子4(PC4)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSTXI

0.047ng/ml胰島素生長因子樣家族成員2(IGFL2)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSTXI
小鼠腸巨噬細胞提取物二醛(MDA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基銨(離子色譜級,≥99.0%(T))

60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三胺(LC-MS淋洗,≥99.5%(GC))

60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基化銨(離子對色譜級)

60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基碘化銨(離子對色譜級)

管緊張素原(AGT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三辛胺(離子對試)

管緊張素原(AGT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鈉(for HPLC,≥99.0%(NT))

管緊張素原(AGT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-己磺鈉(離子對色譜級,>98.0%(T))

脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)高氯鈉，無水(for HPLC,99.0%)

神經(jīng)型一氧化合酶()檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基化銨(離子對色譜級,≥99.0%(AT))

神經(jīng)型一氧化合酶()檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三(光譜級,>99.0%(GC))

神經(jīng)型一氧化合酶()檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)草鈉容量分析用溶液標準物質(zhì)(0.05M)

內(nèi)皮型一氧化合酶(NOS3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氧化鈉容量分析用標準溶液(0.0997mol/L)

內(nèi)皮型一氧化合酶(NOS3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))

C反應蛋白(CRP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)正癸(分析標準品,≥99.5%(GC))

α1-性糖蛋白(α1AGP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(分析標準品,>99.5%(GC))

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行,，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。