細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領域較為寬廣,，如細胞學、免疫學,、腫瘤學,、生物化學、遺傳學,、分子生物學等,； 適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物,，一種動物的不同年齡階段以及不同組織,，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量,、同一時期,、重復性好的,、生物學性狀相似的實驗對象,。

小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物是從小鼠原代淋巴內(nèi)皮細胞提取的，小鼠原代淋巴內(nèi)皮細胞從正常小鼠淋巴組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應體系進行逆轉錄,，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應,。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠淋巴內(nèi)皮組織裂解液，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存,。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標測序,；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學,；<6>芯片研究與表達圖譜,。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品： 

18.75pg/ml成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSH1236I (BSTUI)

9.375pg/ml成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSP1407I (BSRGI)

18.75pg/mlFMS樣酪氨激酶3配體(Flt3L)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)BSP1407I (BSRGI)

0.094ng/mlFMS樣酪氨激酶3配體(Flt3L)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)PSP1406I (ACLI)

0.094ng/ml中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)PSP1406I (ACLI)

0.094ng/ml中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)MVA1269I (BSMI)

0.094ng/ml中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)MVA1269I (BSMI)

4.688pg/ml白介素3調(diào)節(jié)核因子(NFIL3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)NHEI

9.375pg/ml白介素3調(diào)節(jié)核因子(NFIL3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)NHEI

18.75pg/ml白介素3調(diào)節(jié)核因子(NFIL3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)NHEI
小鼠淋巴內(nèi)皮細胞提取物胰淀素(IAPP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯酯(99%,用于HPLC標記)

低氧誘導因子1α(HIF1α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)正戊(農(nóng)殘級)

低氧誘導因子1α(HIF1α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)聚酰胺粉(柱層析用)

低氧誘導因子1α(HIF1α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(色譜級, 85-90%)

B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)聚酰胺粉(柱層析用，200-400目)

B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)聚酰胺粉(柱層析用,，10-30目)

B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T))

白介素6(IL6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)高氯鈉，一水(色譜級,≥99.0%(T))

干擾素γ(IFNγ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)無水鈉(農(nóng)殘級)

90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)無水鈉(for HPLC,≥99.0%(T))

90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)碳鈉(for HPLC,≥99.0%)

90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基二銨(HPLC)

超氧化物歧化酶(SOD)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四己基銨(用于離子色譜,≥99.0%(T))

超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三胺鹽鹽(for HPLC,≥99.0%)

超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四基銨(99%)

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行,，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。