小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物現(xiàn)貨供應(yīng),，質(zhì)量有保證,、*,、實(shí)驗(yàn)效果好,，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū),、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察,、檢測(cè)和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時(shí)電影,、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,，如細(xì)胞學(xué),、免疫學(xué)、腫瘤學(xué),、生物化學(xué),、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等,； 適用的對(duì)象范圍廣,，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究,。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期,、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取的，小鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠腎小球組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片,、OD值測(cè)定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠腎小球內(nèi)皮組織裂解液,，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序,；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。

產(chǎn)品名稱(chēng)	小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物
英文名稱(chēng)	Mouse Kidney：Normal Glomerular Derivatives
貨號(hào)	CS-X3662

 

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號(hào)16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
?以下是公司正在銷(xiāo)售的相關(guān)產(chǎn)品： 

1.875ng/ml干擾素α14(IFNα14)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CFR42I (SACII)

0.094ng/ml干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CSP6I (CVIQI)

0.938ng/ml干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)DRAI

46.875pg/ml干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)DRAI, HC

46.875pg/ml干擾素α10(IFNα10)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)EAM1104I (EARI)

0.188ng/ml干擾素α10(IFNα10)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)EAM1104I (EARI)

1.875U/ml干擾素α8(IFNα8)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)EAM1105I (AHDI)

0.375U/ml干擾素α7(IFNα7)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)ECL136II (ECOICRI)

0.938ng/ml干擾素α6(IFNα6)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)ECOO109I

9.375pg/ml干擾素α5(IFNα5)檢測(cè)試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)ECORI
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(無(wú)水級(jí),99.8%)

熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(≥99.9%(GC))

熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(ACS)

熱休克蛋白40(HSP40)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(色譜級(jí)+, ≥99.9%)

熱休克蛋白40(HSP40)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(蛋白測(cè)序級(jí),，≥99.9%)

熱休克蛋白40(HSP40)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(用于揮發(fā)性有機(jī)物的GC/MS分析， ≥99.9％)

90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(95%) (AR,95.0%)

70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(95%) (for HPLC)

90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(95%) (GR,95.0%)

脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(95%) (ACS)

脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%藥用酒精 (藥用級(jí))

脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)無(wú)水醇（藥用級(jí),99.5%）

內(nèi)皮型一氧化合酶(NOS3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(AR,99.7%)

內(nèi)皮型一氧化合酶(NOS3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(GR,99.8%)

內(nèi)皮型一氧化合酶(NOS3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醇(ACS,≥99.5%)

細(xì)胞分類(lèi)：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過(guò)后，T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù),，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，進(jìn)口來(lái)源,，保證5代以?xún)?nèi),，活力>95%，無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。