細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據實際進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領域較為寬廣，如細胞學,、免疫學,、腫瘤學、生物化學,、遺傳學、分子生物學等,； 適用的對象范圍廣,，從低等動物到高等動物,，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量,、同一時期、重復性好的,、生物學性狀相似的實驗對象,。

小鼠肺動脈成纖維細胞提取物是從小鼠肺動脈成纖維細胞提取的，小鼠肺動脈成纖維細胞從正常小鼠肺動脈組織制備,。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量,。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測定結果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應10min 后終止RT反應,。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應,。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠肺動脈成纖維組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質組學,；<6>芯片研究與表達圖譜。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關產品： 

0.188ng/ml小板衍生生長因子C(PDGFC)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER CFR9I

0.188ng/ml小板衍生生長因子C(PDGFC)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER CFR10I

0.469ng/ml小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER ECORI

9.375pg/ml小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER BSP143I

0.188ng/ml小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X TAQ BUFFER/KCL &15MM MGCL2

0.094ng/ml小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)DILUTION BUFFER FOR RE

46.9pg/ml小板衍生生長因子受體樣蛋白(PDGFRL)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER ECO52I

0.094ng/ml小板衍生生長因子受體樣蛋白(PDGFRL)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER SDUI, PPU21I

0.375ng/ml小板衍生生長因子受體樣蛋白(PDGFRL)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER SDAI

0.094ng/ml生長激素2(GH2)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)10X BUFFER EAM1105I
小鼠肺動脈成纖維細胞提取物Neutral Balsam/中性樹膠月桂酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))

NC膜(0.45um)酰酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))

NC膜(0.22um)基基(standard for GC, ≥99.5% (GC))

myc標簽免疫親和介質嗎啉(Standard for GC,≥99.5%(GC))

Myc標簽蛋白裂解液棕櫚酯(Standard for GC,≥98.0%(GC))

myc Tag IP/Co-IP Kitmyc標簽免疫沉淀試盒酯(Standard for GC,≥99.7%(GC))

Multi-tagged Protein Lysate/多標簽蛋白裂解液水楊酯(standard for GC,≥99.5%(GC))

Multi-tagged Protein Lysate(E.coli)/多標簽蛋白裂解液(E.coli)油酯(Standard for GC,≥99%(GC))

Multi-tagged Protein Lysate(293T)/多標簽蛋白裂解液(293T)十一酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC))

MRC5/成纖維細胞己酯(Standard for GC,>99.5%(GC))

Mounting Solution(aqueous)/水性封片醇(Standard for GC,>99.9%)

MOLT-4全細胞裂解液正壬(standard for GC,≥99.5%(GC))

Molt-4/急性淋巴母細胞白病細胞鄰硝基苯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))

MGC803全細胞裂解液對硝基苯(standard for GC,≥99.5%(GC))

MDA231全細胞裂解液間硝基苯(Standard for GC)

細胞分類：

一種：
是凍存產品,，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源,，保證5代以內,，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。