細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領域較為寬廣,，如細胞學、免疫學,、腫瘤學,、生物化學、遺傳學,、分子生物學等,； 適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物,，一種動物的不同年齡階段以及不同組織,，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量,、同一時期,、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象,。

人乳腺癌組織源細胞提取物是從人原代乳腺癌組織源細胞提取的,，人原代乳腺癌組織源細胞從人乳腺癌組織制備。人乳腺癌組織采集自各地方醫(yī)院,，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量、電泳照片,、OD值測定結果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應,。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人乳腺癌組織源組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學,；<6>芯片研究與表達圖譜。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品： 

9.375pg/ml骨保護素(OPG)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hUbiquitinB

46.9pg/ml抑瘤素M(OSM)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hWASP

0.094ng/ml白介素12(IL12)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mB29

3.75pg/ml調(diào)節(jié)激活正常T-細胞表達分泌因子(RANTES)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mCD68

37.5pg/ml調(diào)節(jié)激活正常T-細胞表達分泌因子(RANTES)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mCOX2

9.375pg/ml干細胞因子(SCF)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mDesmin

28.125pg/ml干細胞因子(SCF)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mEF1

0.469ng/ml干細胞因子受體(SCFR)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-meIF4A1

9.375pg/ml轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mGFAP

9.375pg/ml轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-mGRP78
人乳腺癌組織源細胞提取物脂肪合酶(FASN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)慶大（標準品）

金屬蛋白1M(MT1M)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)利福SV（標準品）

Vasorin蛋白(VASN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)SL327

精胺氧化酶(SMOX)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)麥迪（標準品）

絲氨棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長鏈性亞基1(SPTLC1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)妥布（標準品）

基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)制（標準品）

5羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(SERT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)磺芐西林（標準品）

3-羥基3-基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酰螺旋（標準品）

鈣調(diào)蛋白樣蛋白5(CALML5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三氯氨鉑鉀

軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西索米星（標準品）

AF4/FMR2家族成員1(AFF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大觀（標準品）

白介素1家族成員9(IL1F9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5-基四葉

基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)吉它（標準品）

次黃嘌呤核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)交沙（標準品）

WNT抑制因子1(WIF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)醋麥迪（標準品）

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行,，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源,，保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。