詳細介紹
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進口來源,保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。
人體宮頸癌組織源細胞提取物是從人體宮頸癌組織源細胞提取的,人體宮頸癌組織源細胞從人體宮頸癌組織制備,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng),。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人體宮頸癌組織源組織裂解液,離心去除組織碎片,,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存,。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接,;<3>基因克隆與目標(biāo)測序,;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué),;<6>芯片研究與表達圖譜,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human Cancer: Cervical Cancer Tissues Cells Derivatives |
貨號 | CS-X3612 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,,同時,可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%,;北美胎牛血清(United States,GIBCO,,貨號16000-044),,15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
46.9pg/ml瘦素(LEP)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hFerL/RU5'
0.938ng/ml瘦素(LEP)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-FLT1
37.5pg/mlL選擇素(SELL)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hFibronectin
46.875pg/ml單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hGAPDH
0.094ng/ml單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hGFAP
0.094ng/ml單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hGP2b
46.875pg/ml單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hGRP78
0.188ng/ml單核細胞趨化蛋白3(MCP3)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hGRP94
4.688pg/ml巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hHE4
75pg/ml巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)pDRIVE5Lucia-hHSP70
人體宮頸癌組織源細胞提取物Zeste同源物增強子2(EZH2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)赤蘚紅(標(biāo)準(zhǔn)品)
微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)性紅 73(標(biāo)準(zhǔn)品)
肝配蛋白A4(EFNA4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)月桂(標(biāo)準(zhǔn)品)
EB病誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)7,4'-二羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)
前妊娠蛋白關(guān)聯(lián)子宮內(nèi)膜蛋白(PAEP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)千金子素L1(標(biāo)準(zhǔn)品)
淋巴細胞抗原75(LY75)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)型南五味子素(標(biāo)準(zhǔn)品)
CD276分子(CD276)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)紫蘇醛(標(biāo)準(zhǔn)品)
信號素3E(SEMA3E)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)相思子(標(biāo)準(zhǔn)品)
小白蛋白(PVALB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)漿苦味素L(標(biāo)準(zhǔn)品)
衰老關(guān)鍵蛋白4(FBLN4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-基海因(標(biāo)準(zhǔn)品)
Sideroflexin 1蛋白(SFXN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)古倫賓(標(biāo)準(zhǔn)品)
SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)安五脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)
染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)絡(luò)石苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品)
氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)毛蘭素(標(biāo)準(zhǔn)品)