細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。

人淋巴成纖維細(xì)胞提取物是從人淋巴成纖維細(xì)胞提取的，人淋巴成纖維細(xì)胞從正常人淋巴組織制備,。正常人淋巴組織采集自各地方醫(yī)院,，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化,。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量,、電泳照片,、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量,。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人淋巴成纖維組織裂解液,，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序,；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜,。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí)，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號(hào)16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.469ng/ml鴨白介素2(IL-2)ELISA試盒HKBF

0.281ng/ml鴨白介素1(IL-1)ELISA試盒 HKEB

0.094ng/ml鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試盒HKLR

9.375pg/ml鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試盒HKPA

0.188ng/ml鴨環(huán)腺苷(cAMP)ELISA試盒HKSE

0.188ng/ml鴨子碳酐酶(CA)ELISA試盒HKSP

28.125pg/ml鴨抗凝素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試盒HKSA

0.188ng/ml雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試盒 LTA-BS

37.5 pg/ml兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試盒PGN-BS

0.188ng/ml兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試盒PGN-SA
人淋巴成纖維細(xì)胞提取物頭蛋白(NOG)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)環(huán)吡;環(huán)匹羅司

載脂蛋白B100(APOB100)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)環(huán)吡;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)

白介素25(IL25)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磺胺（標(biāo)準(zhǔn)品）

胱天蛋白酶1(CASP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磺胺二嘧啶

成纖維細(xì)胞生長因子15(FGF15)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磺胺二嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品）

線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)雙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）

分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)糖精（標(biāo)準(zhǔn)品）

趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)酚酞（標(biāo)準(zhǔn)品）

信號(hào)素3A(SEMA3A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氨基己（標(biāo)準(zhǔn)品）

神經(jīng)束蛋白(NFASC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)水楊（標(biāo)準(zhǔn)品）

棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2(CPT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)α-基吡啶（標(biāo)準(zhǔn)品）

膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽帕他莫

棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1B(CPT1B)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽帕他莫(標(biāo)準(zhǔn)品)

四旋蛋白1(TSPAN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽萘唑啉（標(biāo)準(zhǔn)品）

亮氨豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)壬苯醇醚（標(biāo)準(zhǔn)品）