細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影,、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,，如細(xì)胞學(xué),、免疫學(xué)、腫瘤學(xué),、生物化學(xué),、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等,； 適用的對象范圍廣,，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織,，都可進(jìn)行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期,、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

人子宮頸上皮細(xì)胞提取物是從人子宮頸上皮細(xì)胞提取的,，人子宮頸上皮細(xì)胞從正常人子宮頸組織制備,。正常人子宮頸組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行,。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究,。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度,、總含量,、電泳照片、OD值測定結(jié)果等,。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈,，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA,。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng),。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人子宮頸上皮組織裂解液,，離心去除組織碎片,，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,，-80度保存,。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆,；<2>mRNA選擇性剪接,；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot,；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué),；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

18.75pg/ml雞白病病抗原(ALV-AG)ELISA試盒ODN 1668

18.75pg/ml雞抗凝酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試盒ODN 1826

46.875pg/ml雞抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試盒 ODN 2006 (ODN 7909)

0.094ng/ml雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試盒ODN 2006-G5

0.094ng/ml雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試盒 ODN 2007

0.094ng/ml雞酰檢測(ACAC)ELISA試盒ODN 2088

37.5pg/ml雞5核苷酶(5-NT)ELISA試盒 ODN 2216

0.188ng/ml雞17-類固醇(17-KS)ELISA試盒ODN 2336

0.094ng/ml雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試盒 ODN 2395

0.094ng/ml紅螯光殼螯蝦卵黃脂蛋白/卵黃蛋白(Lv/Vn)ELISA試盒ODN 4084-F
人子宮頸上皮細(xì)胞提取物鈣離子轉(zhuǎn)運ATP酶A2(ATP2A2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)

尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3,，5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酯（標(biāo)準(zhǔn)品）

S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯噻啶（標(biāo)準(zhǔn)品）

S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氟哌啶醇（標(biāo)準(zhǔn)品）

蛋白Z依性蛋白酶抑制因子(ZPI)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)β-環(huán)糊精（標(biāo)準(zhǔn)品）

氨酰氧化酶(LOX)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)卡托普利二化物（標(biāo)準(zhǔn)品）

胞裂蛋白6(SEPT6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)林旦（標(biāo)準(zhǔn)品）

蛋氨腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯碘羥喹（標(biāo)準(zhǔn)品）

GPI錨定分子樣蛋白(GML)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)沙胺醇（標(biāo)準(zhǔn)品）

B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)普拉睪鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）

核糖體蛋白L23A(RPL23A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)撲米（標(biāo)準(zhǔn)品）

同線蛋白2(ST2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)葡萄糖鋅（標(biāo)準(zhǔn)品）

Endoglin蛋白(ENG)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)曲安西龍（標(biāo)準(zhǔn)品）

CD19分子(CD19)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)舒林（標(biāo)準(zhǔn)品）

鉀中間小電導(dǎo)鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HSP990

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。