詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,,包括活細胞的形態(tài),、結構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,,同時,,可以施加化學、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領域較為寬廣,,如細胞學、免疫學,、腫瘤學,、生物化學,、遺傳學、分子生物學等,; 適用的對象范圍廣,,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進行有針對性的研究,。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期,、重復性好的,、生物學性狀相似的實驗對象。
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,,以降低雜細胞的污染,,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,,原代細胞可以保持分化狀態(tài),,進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2、說明書及注意事項,;3,、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,,如是新鮮原代細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,,不得用于臨床應用,。
產品名稱 | |
英文名稱 | RatBrain:NormalNerveAstrocytes |
貨號 | CS-X3485 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號16000-044),,15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。
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E1A激活基因阻遏子1(CREG1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,5-二-1,4-苯醌(>98.0%(GC))
維受體α(RARα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,5-二氧基-1,4-苯醌(>98.0%(GC))
細胞分類:
一種:
是凍存產品,,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好,;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種:
是我們復蘇好細胞,,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐),。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產品全部經過QC檢測,,進口來源,保證5代以內,,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。