培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定,。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2,、說明書及注意事項；3,、公司售后服務(wù)標準,。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞,，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用,。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源,，保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

18.75pg/ml人同型半胱氨(Hcy)ELISA試盒pUNO1-mIL01R2(s)

18.75pg/ml人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試盒pUNO1-mIL01RAPa(mb)

0.188ng/ml人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試盒pUNO1-mIL01RAPL2

0.094ng/ml人組織蛋白去?；?HD)ELISA試盒pUNO1-mIL01RL1a

9.375pg/ml人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試盒pUNO1-mIL01RL1b

0.094ng/ml人富組蛋白(HTN5)ELISA試盒pUNO1-mIL01RL2

9.375pg/ml人組胺(HIS)ELISA試盒pUNO1-mIL01RNa

46.875pg/ml人水蛭素(HRD)ELISA試盒 pUNO1-mIL2

11.25pg/ml人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試盒 pUNO1-mIL20

0.469ng/ml人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試盒pUNO1-mIL20RA
大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細胞多聚免疫球蛋白受體(PIGR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-正十八基噻吩(>98.0%(GC))

S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-正辛基-2-(4,4,5,5-四基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)-2-基)噻吩(>96.0%(GC))

S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-戊基噻吩(>95.0%(GC))

干擾素誘導(dǎo)T-細胞α亞族趨化(ITαC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-基噻吩(>96.0%(GC))

SATB同源框蛋白1(SATB1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-十一基噻吩(>97.0%(GC))

乳脫酶C(LDHC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2--5-基噻吩(含穩(wěn)定銅芯和碳鈉)(>95.0%(GC))

CUB帶狀瘡疹透區(qū)樣域蛋白1(CUZD1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3--4-基噻吩(>93.0%(GC))

貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,2'-聯(lián)噻吩-5-醛(>98.0%(GC))

生長停滯特性蛋白6(GAS6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5--2,2'-聯(lián)噻吩-5'-醛(>98.0%(HPLC))

信號素3E(SEMA3E)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5''--2,2':5',2''-三聯(lián)噻吩-5-醛(>94.0%(GC))

抗凝酶(AT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5--2-噻吩羧(>98.0%(GC)(T))

絨毛蛋白1(VIL1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5--2-噻吩硼(含有數(shù)量不等的酐)

前列腺干細胞抗原(PSCA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-噻吩-2-醛(>95.0%(GC))

前胸腺素α(PTMα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5--5'-(4,4,5,5-四基-1,3,2-二氧雜戊硼-2-基)-2,2'-并噻吩(>97.0%(GC))

Kruppel樣因子1(KLF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-噻吩[3,2-b]噻吩(>94.0%(GC))