詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,,包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學,、免疫學、腫瘤學,、生物化學,、遺傳學、分子生物學等,; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量,、同一時期、重復性好的,、生物學性狀相似的實驗對象,。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定,。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),,進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,,且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2,、說明書及注意事項;3,、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,,如是新鮮原代細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研,,不得用于臨床應用。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells |
貨號 | CS-X3458 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號16000-044),,15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
0.094ng/ml人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試盒pUNO1-mAXLa
0.094ng/ml人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA試盒 pUNO1-mB2M
0.188ng/ml人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試盒pUNO1-mB4GALT1
18.75pg/ml人神經(jīng)特性烯醇化酶(NSE)ELISA試盒pUNO1-mB71
46.9pg/ml人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試盒 pUNO1-mB72
0.094ng/ml人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試盒 pUNO1-mB7H3
0.375ng/ml人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試盒 pUNO1-mBADa
0.094ng/ml人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試盒 pUNO1-mBADb
0.094ng/ml人腦紅蛋白(NGB)ELISA試盒pUNO1-mBAFF
0.094ng/ml人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試盒pUNO1-mTNFRSF13C
大鼠腎上皮細胞谷光甘肽合成酶(GSS)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)吡嗪(>98.0%(GC))
角蛋白6C(KRT6C)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,3-吡嗪二羧(>98.0%(HPLC)(T))
犬尿氨酶(KYNU)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,6-吡啶二羧(>98.0%(GC)(T))
精氨加壓素原(VP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)吖嗪(>98.0%(GC))
前催產(chǎn)素原(OT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,4,6-三(4-吡啶基)-1,3,5-三嗪(升華精制品)(>97.0%(N))
脫氧胸苷激酶(DTYMK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)茴香偶酰(>98.0%(GC))
類胰蛋白酶δ1(TPSδ1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯偶酰(>99.0%(GC))
類胰蛋白酶γ1(TPSγ1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-苯酰苯(>99.0%(T))
甘肽受體4(GALR4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯偶酰 (區(qū)域精制法精制,熔段數(shù):22)
甘肽受體3(GALR3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)安息香基醚(>98.0%(GC))
甘肽受體2(GALR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)安息香醚(>99.0%(GC))
金屬蛋白1X(MT1X)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)安息香基醚(>95.0%(GC))
金屬蛋白1H(MT1H)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-苯酰苯(>98.0%(T))
金屬蛋白1F(MT1F)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-苯酰苯酯(>98.0%(GC))
金屬蛋白1G(MT1G)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-芐基-2-(二基氨基)-4'-嗎啉基苯基(>98.0%(HPLC)(T))
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好,;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,,只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進口來源,,保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染,。