詳細介紹
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,,貨號16000-044),15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定,。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),,進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,,保證細胞的純度在90%以上,,且不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2,、說明書及注意事項;3,、公司售后服務標準,。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,,不得用于臨床應用,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | RatBone:NormalArticularChondrocytes |
貨號 | CS-X3425 |
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好,;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種:
是我們復蘇好細胞,,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,,保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,,包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學,、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備,。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品:
0.094ng/ml人抗類固醇生成細胞抗體(SCA)ELISA試盒 pUNO1-hPDCD8a
0.469ng/ml人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試盒pUNO1-hPDGFAb
0.188ng/ml人干細胞因子受體(SCFR)ELISA試盒pUNO1-hPDGFBa
18.75pg/ml人金葡菌腸素(SE)ELISA試盒 pUNO1-hPDGFRA
28.125pg/ml人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試盒 pUNO1-hPEBP1
0.094ng/ml人抗SS-B/La抗體ELISA試盒pUNO1-hPECAM1
0.188ng/ml人清白蛋白(HSA)ELISA試盒pUNO1-hPEDF
0.094ng/ml人鱗狀細胞癌相關抗原(SCCAg)ELISA試盒pUNO1-hPELI1
0.094ng/ml人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試盒pUNO1-hPELI2
0.375ng/ml人脾臟酪氨激酶(Syk)ELISA試盒 pUNO1-hPELI3a
大鼠關節(jié)軟骨細胞3-羥基脫酶2(BDH2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-基-4'-羥基聯(lián)苯(>98.0%(GC))
寡糖轉(zhuǎn)移酶4(OST4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-庚基苯腈(>98.0%(GC))
失調(diào)蛋白8(ATXN8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-(反-4-基環(huán)己基)苯腈(>98.0%(GC))
谷胱甘肽過氧化酶8(GPX8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)對基苯腈(>98.0%(GC))
Paralemmin 3蛋白(PALM3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1--4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T))
絲聚蛋白2(FLG2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-基環(huán)己 (順反混合物)(>98.0%(GC)(T))
脂質(zhì)運載蛋白15(LCN15)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-基環(huán)己(順反構(gòu)體混和物)(>98.0%(GC)(T))
防御素β132(DEFβ132)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)反-4-基環(huán)己)(>98.0%(GC)(T))
L-天冬氨脫酶(ASPDH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)反-4-基環(huán)己(>98.0%(T)(GC))
Clarin 2蛋白(CLRN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-基環(huán)己(順反構(gòu)體混和物))(>98.0%(GC)(T))
癌調(diào)蛋白2(OCM2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-苯(>99.0%(GC))
雙調(diào)蛋白B(AREGB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1--4-壬基苯(>95.0%(GC))
封閉蛋白24(CLDN24)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1--4-戊苯(>90.0%(GC))
脂肪轉(zhuǎn)移酶2(LIPT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1--4-己苯(>90.0%(GC))
RIO激酶2(RIOK2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1--4-庚苯(含穩(wěn)定銅屑)(>95.0%(GC))