培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行,。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定,。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,，保證細(xì)胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項(xiàng),；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn),。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用,。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

9.375pg/ml小鼠抗IVIgG抗體ELISA試盒pUNO1-hIFNA16

0.375ng/ml小鼠抗IgE受體抗體ELISA試盒pUNO1-hIFNA17

0.188ng/ml小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試盒 pUNO1-hIFNA2b

0.094ng/ml小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試盒pUNO1-hIFNA21

46.9pg/ml小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試盒pUNO1-hIFNA2a

0.188ng/ml小鼠抗利尿激素/管加壓素/精氨加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試盒 pUNO1-hIFNA4

0.188ng/ml小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試盒 pUNO1-hIFNA5

46.875pg/ml小鼠抗心脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試盒pUNO1-hIFNA6

9.375pg/ml小鼠抗心脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試盒pUNO1-hIFNA7

0.094ng/ml小鼠抗心脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試盒pUNO1-hIFNA8
小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞法尼基轉(zhuǎn)移酶α(FNTα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)替考拉寧A2

類脂肪酶A(LPHA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)泰諾福韋鹽

脂素1(LPIN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Mono-POC泰諾福韋

脂素2(LPIN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)N-去基特比萘芬

脂素3(LPIN3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)特比萘芬-d7鹽鹽

粘脂蛋白1(MCOLN1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)羥基特比萘芬

粘脂蛋白2(MCOLN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷

粘脂蛋白3(MCOLN3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)胸腺五肽

Ly6/神經(jīng)素1(LYNX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)替米考星鹽

溶卵脂?；D(zhuǎn)移酶1(LPCAT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)外消旋噻嗎洛爾-d5 馬來鹽

溶卵脂?；D(zhuǎn)移酶2(LPCAT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)外消旋馬來噻嗎洛爾

溶卵脂酰基轉(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(R)-(+)-馬來噻嗎洛爾

溶卵脂?；D(zhuǎn)移酶4(LPCAT4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(S)-(-)-馬來噻嗎洛爾

膽/醇胺轉(zhuǎn)移酶1(CEPT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)替硝唑標(biāo)記d4

醇胺轉(zhuǎn)移酶1(EPT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)妥布A