培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定,。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項,；3、公司售后服務(wù)標準,。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇,。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用,。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源,，保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.469ng/ml小鼠c-fos ELISA試盒 pUNO1-hGCSFb

0.094ng/ml小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA試盒pUNO1-hGDNFa

0.469ng/ml小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試盒pUNO1-hGFI1

0.938IU/ml小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試盒pUNO1-hGH1a

0.094ng/ml小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試盒pUNO1-hGITRL

9.375pg/ml小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試盒 pUNO1-hGMCSF

46.9pg/ml小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試盒pUNO1-hGOLM1

0.094ng/ml小鼠碳酐酶(CA)ELISA試盒pUNO1-hGZMA

0.188ng/ml小鼠碳酐酶2(CA-2)ELISA試盒pUNO1-hGZMB

0.094ng/ml小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試盒 pUNO1-hGRN
小鼠淋巴成纖維細胞神經(jīng)肽B(NPB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)喹平二聚體雜質(zhì)

生長抑素受體2(SSTR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羥基喹平雜質(zhì)

生長抑素受體3(SSTR3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-氧基喹平

生長抑素受體4(SSTR4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)喹平磺鹽

生長抑素受體5(SSTR5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)7-芐氧基-N-des{[2-(2-羥基)氧基]基} 喹平

視蛋白5(OPN5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)喹平

視蛋白4(OPN4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)7-羥基喹平

視蛋白3(OPN3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)雷特格韋

犁鼻1受體2(VN1R2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)雷特格韋-d3,，鉀鹽

犁鼻1受體3(VN1R3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)雷特格韋β-D-葡萄糖苷

犁鼻1受體4(VN1R4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)seco雷帕鈉鹽

犁鼻1受體5(VN1R5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西羅莫司化物

戊二受體1(OXGR1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西羅莫司脂化物

琥珀受體1(SUCNR1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)佐他莫司

Synerginγ蛋白(SYNRγ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)雷沙吉蘭