培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài),，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項,；3,、公司售后服務(wù)標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行,，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學,、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.469ng/ml小鼠葉(FA)ELISA試盒pUNO1-hDNMT2a

0.094ng/ml小鼠FMS樣酪氨激酶3(Flt3)ELISA試盒 pUNO1-hDNMT3Aa

0.188ng/ml小鼠FMS樣酪氨激酶3配體(Flt3L)ELISA試盒pUNO1-hDNMT3Bc

9.375pg/ml小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試盒pUNO1-hDNMT3Lb

18.75pg/ml小鼠纖蛋白原(Fbg)ELISA試盒pUNO1-hDOK3ba

4.688pg/ml小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試盒pUNO1-hDOT1L

46.9pg/ml小鼠凝因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試盒pUNO1-hDUFFYb

9.375pg/ml小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試盒pUNO1-hEEF2

0.094ng/ml小鼠B因子(BF)ELISA試盒pUNO1-hEG1

0.094ng/ml小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試盒pUNO1-hEGF
小鼠輸尿管上皮細胞尿溶蛋白1B(UPK1B)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)非那雄胺羧

尿溶蛋白2(UPK2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷

管非炎性蛋白2(VNN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4'-羥基氟比洛芬

線粒體融合素2(MFN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)去烯加替沙星

Midline 2蛋白(MID2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)去烯加替沙星

多聚蛋白2(MMRN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)O-去吉非替尼

Metaxin 2蛋白(MTX2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)O-Desmorpholinopropyl吉非替尼

黑素皮質(zhì)激素4受體(MC4R)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3'-Epi 吉西他濱

黑素皮質(zhì)激素5受體(MC5R)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1'-Epi 鹽吉西他濱

神經(jīng)元導向因子3(NAV3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1'-Epi吉西他濱'-Dibenzoate

神經(jīng)元導向因子2(NAV2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-去 2-基格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)A）

溶脂酶Ⅲ(LYPLA3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-去 格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)B）

Piccolo蛋白(PCLO)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-基吲唑-3-羧（格拉司瓊雜質(zhì)D）

腎胱素5(NPHP5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)endo-9-基-9-雜雙環(huán)[3.3.1]壬-3-胺（格拉司瓊雜質(zhì)F）

二酯酶7A(PDE7A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)9'-去格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)C）