培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定,。在公司技術部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項,；3,、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源，保證5代以內,，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品： 

0.469ng/ml小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試盒pUNO1-hCD93

9.375pg/ml小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試盒pUNO1-hCEBPB

0.094ng/ml小鼠全段狀旁腺素(i-PTH)ELISA試盒 pUNO1-hCEBPG

0.094ng/ml小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試盒 pUNO1-hCENTB1

18.75pg/ml小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試盒pUNO1-hCFLAR

0.094ng/ml小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試盒pUNO1-hCGAS

0.094ng/ml小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試盒pUNO1-hCIITA

18.75pg/ml小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試盒pUNO1-hCIRBPa

9.375pg/ml小鼠胰島素(INS)ELISA試盒pUNO1-hCITED2

0.188ng/ml小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試盒pUNO1-hCLCF1a
成年小鼠心肌細胞輸出蛋白6(XPO6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-羥基阿托伐他汀內酯

輸出蛋白4(XPO4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-羥基阿托伐他汀內酯

輸出蛋白3(XPO3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-羥基阿托伐他汀內酯-d5

24-脫膽固醇還原酶(DHCR24)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-羥基阿托伐他汀單鈉鹽二水合物

蛋白O-巖藻糖基轉移酶2(POFUT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿托伐他汀內酯

巖藻糖基轉移酶2(FUT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿托伐他汀 酰基-β-D-葡萄糖醛苷 70%, 含 30% 內酯

巖藻糖基轉移酶1(FUT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)脫氟阿托伐他汀鈉

巖藻糖基轉移酶11(FUT11)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿托伐他汀內酯-d5

巖藻糖基轉移酶5(FUT5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿托伐他汀叔基酯

巖藻糖基轉移酶6(FUT6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿托伐他汀酯

巖藻糖基轉移酶7(FUT7)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)卓斯汀-13C,d3

巖藻糖基轉移酶8(FUT8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)N-去卓斯汀

巖藻糖基轉移酶9(FUT9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(S)-鹽卓斯汀

氨基?；?(ACY2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(R)-鹽卓斯汀

內收蛋白3(ADD3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)9-去氧-9a-雜-同型紅A 去阿奇