培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,，以降低雜細(xì)胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度,。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項,；3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,，如是新鮮原代細(xì)胞,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗操作,。如是凍存細(xì)胞,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用,。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.188ng/ml小鼠化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試盒 pUNO1-hAXLa

0.094ng/ml小鼠脂酰絲氨(PS)ELISA試盒 pUNO1-hB2M

0.094ng/ml小鼠脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試盒pUNO1-hB4GALT1a

0.094ng/ml小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試盒 pUNO1-hB71

0.188ng/ml小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試盒pUNO1-hB72b

0.469ng/ml小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試盒pUNO1-hB7H3a

46.875pg/ml小鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA試盒 pUNO1-hICOSLGa

0.094ng/ml小鼠狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試盒pUNO1-hBAD

0.469ng/ml小鼠對氨基苯(PABA)ELISA試盒pUNO1-hBAFF

0.188ng/ml小鼠p53(p53)ELISA試盒pUNO1-hTNFRSF13C
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞髓過氧化物酶（MPO）測試盒小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞

溶菌酶（LZM）測試盒（帶標(biāo)準(zhǔn)）小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞

溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞

微球菌粉小鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞

解脲（溶脲）支原體快速培養(yǎng)基（UU培養(yǎng)基）小鼠卵巢顆粒細(xì)胞

人型支原體快速培養(yǎng)基小鼠脈胳膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞凋亡測試盒（TdT酶、稀釋液,、POD）小鼠脈絡(luò)膜微管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞凋亡測試盒（全套）小鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞

（TdT介導(dǎo)的原位末端切口平移雙標(biāo)記法）小鼠腦動脈管內(nèi)皮細(xì)胞

唾液（SA）測試盒（帶SA標(biāo)準(zhǔn)）小鼠腦動脈管平滑肌細(xì)胞

肝素溶液小鼠腦膜細(xì)胞,，MMC細(xì)胞

肝素抗凝管小鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元

肝素抗凝管小鼠腦微管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)   品   名   稱小鼠腦管周細(xì)胞

鉀（K）測試盒（帶標(biāo)準(zhǔn)）小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞