詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據實際進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影,、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學,、腫瘤學,、生物化學、遺傳學,、分子生物學等,; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量,、同一時期,、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象,。
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定,。在公司技術部標準的操作流程下,,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能,。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,,且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2,、說明書及注意事項,;3、公司售后服務標準,。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,,如是新鮮原代細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研,,不得用于臨床應用。
產品名稱 | |
英文名稱 | MouseBoneJoint:NormalSynovialCell |
貨號 | CS-X3343 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,,貨號16000-044),15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。
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小鼠滑膜細胞小氣道上皮細胞大鼠子宮內膜上皮細胞
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支氣管平滑肌細胞雞輸卵管上皮細胞
小氣道平滑肌細胞清道夫魚魚唇表皮細胞
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心室肌細胞人naive T cell細胞
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主動脈平滑肌細胞人膀胱平滑肌細胞,HBSMCGD細胞
臍靜脈內皮細胞人膀胱上皮細胞
臍動脈內皮細胞人扁桃體成纖維細胞,,HTFTR細胞
臍靜脈平滑肌細胞人扁桃體上皮細胞,,HTECL細胞
細胞分類:
一種:
是凍存產品,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,,還是復蘇沒操作好,;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐),。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,,保證5代以內,,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染,。