詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片,、縮時(shí)電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué),、腫瘤學(xué),、生物化學(xué),、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等,; 適用的對(duì)象范圍廣,,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究,。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期,、重復(fù)性好的,、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,,以降低雜細(xì)胞的污染,,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),,進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度,。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2、說明書及注意事項(xiàng),;3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,,如是新鮮原代細(xì)胞,,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,。如是凍存細(xì)胞,,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | HumanEyes:NormalChoroidalVas cular SmoothMuscle Cells |
貨號(hào) | CS-X3331 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號(hào)16000-044),,15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
0.094ng/ml兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA試盒 HEK-Blue™ IL-1β cells
0.094ng/ml兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試盒 HEK-Blue™ IL-1R Cells
18.75pg/ml兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試盒HEK-Blue™ IL-2 Cells
0.094ng/ml兔子性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試盒 HEK-Blue™ IL-4/IL-13 cells
0.188ng/ml兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試盒 HEK-Blue™ KD-TLR5 cells
46.875pg/ml兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試盒 HEK-Blue™ mDectin-1b Cells
18.75pg/ml兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試盒 HEK-Blue™ mDectin-2 Cells
9.375pg/ml兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試盒HEK-Blue™ mMincle Cells
0.188ng/ml兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA試盒HEK-Blue™ m cells
0.188ng/ml兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試盒HEK-Blue™ mNOD2 cells
人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞氣道平滑肌細(xì)胞小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CT26.WT細(xì)胞
肺成纖維細(xì)胞小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,,MC38細(xì)胞
支氣管上皮細(xì)胞小鼠結(jié)腸細(xì)胞,,CT26細(xì)胞
支氣管成纖維細(xì)胞小鼠巨噬細(xì)胞,Ana-1細(xì)胞
心肌細(xì)胞小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞,,SVEC4-10細(xì)胞
心肌成纖維細(xì)胞小鼠淋巴瘤細(xì)胞,,EL-4細(xì)胞
主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠淋巴瘤細(xì)胞,YAC-1細(xì)胞
主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞,,ID8細(xì)胞
大隱靜脈平滑肌細(xì)胞小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,,neuro-2a細(xì)胞
冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠腦微管內(nèi)皮細(xì)胞株,Bend.3細(xì)胞
食管上皮細(xì)胞小鼠逆轉(zhuǎn)錄病包裝株,,PT-67細(xì)胞
食管平滑肌細(xì)胞小鼠胚胎成骨細(xì)胞,,MC3T3-E1細(xì)胞
腸平滑肌細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-L1細(xì)胞
腸粘膜上皮細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,,BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,,MEF細(xì)胞
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,,干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好,;另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,,快遞時(shí)間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐),。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,進(jìn)口來源,,保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。