培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定,。在公司技術部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項,；3,、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用,。

細胞分類：

一種：
是凍存產品,，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產品全部經過QC檢測,，進口來源，保證5代以內,，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品： 

0.094ng/ml兔子白介素1(IL-1)ELISA試盒HT29-Lucia™ AhR Cells

0.188ng/ml兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試盒 Jurkat-Lucia™ NFAT Cells

0.094ng/ml兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試盒 RAW-Blue™ ISG cells

46.9pg/ml兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試盒RAW-Lucia™ ISG Cells

0.938ng/ml兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試盒RAW-Blue™ cells

0.094ng/ml兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試盒Ramos-Blue™ cells

46.875pg/ml兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試盒THP1-Blue™ ISG Cells

0.375ng/ml兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試盒THP1-Lucia™ ISG Cells

0.188ng/ml兔子胰島素(INS)ELISA試盒THP1-Lucia™ NF-κB Cells

1.4pg/ml兔誘導型一氧化合成酶(iNOS)ELISA試盒THP1-Blue™ NF-κB Cells
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原代骨骼肌細胞特制基礎培養(yǎng)基人腎癌細胞,，A704細胞

原代神經元細胞特制基礎培養(yǎng)基人腎癌細胞,，ACHN細胞

原代神經膠質細胞特制基礎培養(yǎng)基人腎癌細胞，OS-RC-2細胞

原代單核細胞特制基礎培養(yǎng)基人腎皮質近曲小管上皮細胞,，HK-2細胞

原代軟骨細胞特制基礎培養(yǎng)基人腎透細胞癌細胞,，786-O細胞

原代上皮細胞培養(yǎng)特制添加人腎細胞腺癌細胞，769-P細胞

原代內皮細胞培養(yǎng)特制添加人十二脂腸腺癌,，HUTU-80細胞

原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加人食管癌細胞,，EC9706細胞

原代成纖維細胞培養(yǎng)特制添加人食管癌細胞，Eca-109細胞

原代心肌細胞培養(yǎng)特制添加人食管癌細胞,，TE-1細胞

原代表皮角化細胞培養(yǎng)特制添加人食管癌細胞,，TE-5細胞

原代系膜細胞培養(yǎng)特制添加人視網膜色素上皮細胞，D407細胞

原代肝實質細胞培養(yǎng)特制添加人視網膜上皮細胞,，ARPE-19細胞

原代腎實質細胞培養(yǎng)特制添加人體肝癌細胞，YY8103細胞