詳細介紹
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,貨號16000-044),,15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現用現配,。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定,。在公司技術部標準的操作流程下,,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能,。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,,且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2,、說明書及注意事項,;3、公司售后服務標準,。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,,再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞,,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研,,不得用于臨床應用。
產品名稱 | |
英文名稱 | HumanKidney:NormalGlomerularEndothelialCells |
貨號 | CS-X3293 |
細胞分類:
一種:
是凍存產品,,由氮直液接拿出,,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,,很難說是細胞自身不行,,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,,多種因素影響產品的質量,;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,,常溫運輸也對細胞影響也不大,,只需加25元運費(順豐),。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,,保證5代以內,,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品:
0.469ng/ml大鼠內皮脂肪酶(EL)ELISA試盒Lys-(Des-Arg9,Leu8)-Bradykinin,(Des- Arg10,Leu9)-Kallidin
37.5pg/ml大鼠內皮抑素(ES)ELISA試盒Lys-(Des-Arg9)- Bradykinin,(Des-Arg10)- Kallidin
0.188ng/ml大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA試盒Lys-(Ala3)-Bradykinin
46.9pg/ml大鼠內分泌腺來源的管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試盒Lys-Bradykinin,Kallidin
18.75pg/ml大鼠多巴胺(DA)ELISA試盒(Des-Arg9,Leu8)-Bradykinin
0.094ng/ml大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)ELISA試盒(Des-Arg9)-Bradykinin
0.094ng/ml大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試盒(D-Arg0,Hyp3,β -(2-thienyl)-Ala5•8,D-Phe7)- Bradykinin
0.094ng/ml大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試盒(D-Arg0,Hyp3,D-Phe7,Leu8)-Bradykinin
56.25pg/ml大鼠D-乳脫酶(D-LDH)ELISA試盒 Bactenecin
0.094ng/ml大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試盒Acetyl-Adhesin (1025-1044) amide
人腎小球內皮細胞Kruppel樣因子2(KLF2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)卡巴拉汀代謝產物(NAP226-90) -標記d4
含卵巢癌免疫反應抗原域蛋白2(OCIAD2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)咖酯
p21蛋白激活激酶4(PAK4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)咖1,1-二代烯酯
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)咖-13C3
神經激肽A(NKA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯基3-咖酯
低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽苯海拉-d6
糖皮質激素受體β(GRβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)普侖司特半水合物
糖皮質激素受體α(GRα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-(2-氧基)苯酚
再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(R)-美托洛爾
前列腺凋亡應答因子4(PAR4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-[4-(2-氧基)苯氧基]-1,2-環(huán)氧
G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)α-羥基美托洛爾(非對映構體混合物)
膽囊收縮素(CCK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(S)-美托洛爾
激活素A受體ⅡA(ACVR2A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1'-[(1-基基)亞氨基]二[3-[4-(2-氧基)苯氧基]-2-醇(非對映構體混合物)
膽綠素還原酶A(BLVRA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)O-去基美托洛爾
成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)草脫氨氯地平