培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,，以降低雜細胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài),，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度,。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項,；3、公司售后服務(wù)標準,。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇,。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

46.9pg/ml大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試盒 Amyloid β-Protein (1-43)

0.469ng/ml大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試盒ent-Amyloid β-Protein (1-42)

0.094ng/ml大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試盒Amyloid β-Protein (1-42) (mouse, rat)

18.75pg/ml大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試盒Amyloid β-Protein (42-1)

0.188ng/ml大鼠凝因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試盒 Amyloid β-Protein (1-42)

18.75pg/ml大鼠凝因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試盒(Cys0)-Amyloid β-Protein (1-40)

46.9pg/ml大鼠凝因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試盒ACTH (1-39) (guinea pig)

1.875mIU/ml大鼠凝因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試盒(D-Ser1)-ACTH (1-24) (human, bovine, rat)

1.875ng/ml大鼠凝因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試盒(Phe2,Nle4)-ACTH (1-24) (human, bovine, rat)

0.094ng/ml大鼠凝因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試盒(D-Lys16)-ACTH (1-24) (human, bovine, rat)
人腎系膜細胞褪黑素受體1A(MTNR1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)DL-氨酰水楊（氨匹林）

鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶β3肽(ATP1β3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)?；Ｋ畻?β-D-葡萄糖苷

結(jié)合珠蛋白(Hpt)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酰水楊酐

胎盤鈣黏蛋白(CDHP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)脫鹽尼卡地平

谷氨半胱氨連接酶(GCLM)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孟魯司特基

抗利尿激素(ADH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)?；萧斔咎?b-D-葡萄糖苷

β-1,3-葡糖醛基移酶1(β3GAT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孟魯司特醚

核因子κB抑制因子α(IκBα)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孟魯司特苯烯

轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孟魯司特亞砜(非對映構(gòu)體混合物)

過氧化還原酶1(PRDX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二孟魯司特鈉鹽

端粒重復(fù)結(jié)合因子1(TERF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)25-羥基孟魯司特

小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)順式-孟魯司特

核連蛋白1(NUCB1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)21(R)-羥基孟魯司特

褪黑素受體1B(MTNR1B)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)21(S)-羥基孟魯司特

松弛素/胰島素樣肽受體3(RXFP3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)孟魯司特二環(huán)己基胺鹽