培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%；北美胎牛血清(United States,，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,，以降低雜細(xì)胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度,。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項,；3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,，如是新鮮原代細(xì)胞,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用,。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種，也較少使用這種方式,，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐),。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

9.375pg/ml大鼠中性粒細(xì)胞膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試盒Orexin B (human)

18.75pg/ml大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試盒(Ala11,D-Leu15)-Orexin B(human)

46.875pg/ml大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試盒Orexin B (mouse, rat)

18.75 pg/ml大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試盒Orphan GPCR SP9155 Agonist P518 (human)

9.375pg/ml大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試盒Orphan GPCR SP9155 Agonist P550 (mouse)

0.375ng/ml大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試盒Osteocalcin (1-49) (human)

0.094ng/ml大鼠神經(jīng)特性烯醇化酶(NSE)ELISA試盒Osteocalcin (7-19)(human)

18.75 pg/ml大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試盒Osteocalcin (37-49)(human)

9.375pg/ml大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試盒(Tyr38,Phe42•46)-Osteocalcin (38-49) (human)

9.375pg/ml大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試盒Neurokinin B
人支氣管成纖維細(xì)胞釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)3-氧羅匹尼羅鹽鹽

釉原蛋白X-連鎖(AMELX)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羅哌卡因-d7

成釉細(xì)胞蛋白(AMBN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羅哌卡因鹽鹽-d7

尿囊酶(ALLC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羅舒伐他汀內(nèi)酯

胍基胺脲水解酶(AGMAT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(3R,5R)-羅舒伐他汀

芳犬尿氨酰胺酶(AFMID)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羅舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷

親尾蛋白(AFTPH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)外消旋西他列汀

腺苷合酶(ADSS)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西他列汀

腎上腺髓質(zhì)素2(ADM2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西他列汀N-鹽

順烏頭酶2(ACO2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)西他列汀氨基酰β-D-葡萄糖苷

Abl交互子2(ABI2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)壯觀鹽鹽

Abl交互子1(ABI1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)壯觀四水化合物

Ajuba蛋白(JUB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)坦索羅辛

高爾基糖蛋白1(GLG1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(S)-坦索羅辛鹽鹽

白介素21受體(IL21R)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)替米沙坦-d3