培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044)，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行,。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染,，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,，保證細胞的純度在90%以上,，且不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項；3,、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮原代細胞,，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出,，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行,，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式,，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大,，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品： 

9.375pg/ml大鼠端粒酶(TE)ELISA試盒Hexanoyl Dipeptide-3 Norleucine Acetate

9.375pg/ml大鼠抗酒石性酶5b(TRACP-5b)ELISA試盒Pentapeptide-8

75pg/ml大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試盒Heptapeptide-6

0.188ng/ml大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試盒Acetyl Heptapeptide-1

9.375pg/ml大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試盒Glutaurine

0.188ng/ml大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試盒 Glutathione

0.094ng/ml大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試盒 Tripeptide-1

0.188ng/ml大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試盒Dipeptide-9

75pg/ml大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試盒Dipeptide-8

0.094ng/ml大鼠生長抑素(SS)ELISA試盒Hexapeptide-2
人成骨細胞人精氨加壓素(AVP)ELISA試盒 布氏湯

人精氨加壓素(AVP)ELISA試盒 Skirrow瓊脂

人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試盒改良CCD瓊脂基礎

人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試盒Bolton湯基礎

人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA試盒哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基

人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA試盒Skirrow瓊脂配套試

人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試盒改良CCD瓊脂配套試

人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試盒Bolton湯配套試

人利鉀尿肽(KP)ELISA試盒 水解酪蛋白胨（MH）瓊脂

人利鉀尿肽(KP)ELISA試盒 布氏湯