培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株,；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度,。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2,、說明書及注意事項,；3、公司售后服務標準,。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進行復蘇,。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用,。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,，一旦細胞狀態(tài)不好,，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好,；另外溫度對細胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響,，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源,，保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品： 

9.375pg/ml 單增李斯特菌(LM)核檢測試盒(熒光-PCR法)(Ser4,Ile8)-Oxytocin,Isotocin

4.688pg/ml蠟樣芽孢桿菌(BC)核檢測試盒(熒光-PCR法)(Thr4,Gly7)-Oxytocin

9.375pg/ml A 族鏈球菌(GAS)核檢測試盒(熒光-PCR法)Abu-Gly

18.75pg/ml麻風桿菌(ML)核檢測試盒(熒光-PCR法)γ -Glu-Abu

9.375pg/ml 空腸彎曲菌(CJ)核檢測試盒(熒光-PCR法)γ -Glu-Gly-Gly

9.375pg/ml 幽門螺旋桿菌(HP)核檢測試盒(熒光-PCR法)Ophthalmic Acid

18.75pg/ml乳桿菌(LB)核檢測試盒(熒光-PCR法)BIBP3226

18.75pg/ml胎兒彎曲菌(CF)核檢測試盒(熒光-PCR法)Neuropeptide Y (human,rat)

0.188ng/ml結(jié)核桿菌(TB)核檢測試盒(熒光-PCR法)Biotinyl-Neuropeptide Y(human, rat)

0.094ng/ml腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核檢測試盒(熒光-PCR法)Neuropeptide Y (freeacid) (human, rat)
RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試盒 烯酯

人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試盒 4-苯酯

人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試盒 對苯酯

人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試盒 三氯酰酯

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試盒 戊酯

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試盒 硬脂酯

人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試盒 硬脂酯

人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試盒 油膽甾醇酯

人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試盒油酯

人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試盒原三酯