培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),，85%,；北美胎牛血清(United States，GIBCO,，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株,；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶,；(3)不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項(xiàng),；3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用,。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好,；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響,，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時,，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.469ng/ml槐凝集素(SJA)ELISA試盒 RRRADDSDDDDD

9.4pg/ml綿羊化腺苷活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試盒Boc-D-Pro-F-OH

0.188ng/ml綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試盒Boc-PLV-Ome

46.875pg/ml綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試盒Boc-PYr-OH

0.094ng/ml綿羊白介素6(IL-6)ELISA試盒 Boc-FFG-OH

28.125pg/ml綿羊白介素2(IL-2)ELISA試盒Boc-FF-OH

0.938ng/ml綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試盒Boc-FGG-OH

0.094ng/ml綿羊白介素1(IL-1)ELISA試盒Boc-MM-OH

37.5pg/ml綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試盒Boc-[Lys(Z)]3 -Obzl

2pg/ml鮭魚降鈣素(SCT)ELISA試盒Boc-Lys(Z)-Gly-Ome
H22小鼠肝癌細(xì)胞人白介素13(IL-13)ELISA試盒氨芐青麥康凱瓊脂基礎(chǔ)

人白介素13(IL-13)ELISA試盒脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂

人白介素12(IL-12/P70)ELISA試盒蔗糖胰蛋白胨湯

人白介素12(IL-12/P70)ELISA試盒AHM鑒別培養(yǎng)基

人白介素12(IL-12/P40)ELISA試盒0.5%無菌TTC溶液

人白介素12(IL-12/P40)ELISA試盒腦—心浸萃瓊脂培養(yǎng)基

人白介素11(IL-11)ELISA試盒LB瓊脂

人白介素11(IL-11)ELISA試盒LB湯

人白介素10(IL-10)ELISA試盒 酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基

人白介素10(IL-10)ELISA試盒 胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基