詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),,可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片,、縮時(shí)電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué),、腫瘤學(xué),、生物化學(xué)、遺傳學(xué),、分子生物學(xué)等,; 適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量,、同一時(shí)期,、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,。
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株,;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2、說明書及注意事項(xiàng),;3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮,、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用,。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 5×105/瓶 |
貨號(hào) | CS-X3245 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),,85%;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,,貨號(hào)16000-044),15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
9.375pg/ml艱難梭菌(TCD-B)核檢測試盒(PCR法)fMLF
9.375pg/ml諾如病(NV)核檢測試盒(RT-PCR法)For-M-L-p-iodo-Phe-OH
0.188ng/ml鹿源性成分(Deer)核檢測試盒(PCR法)For-MLE-OH
18.75 pg/ml牛源性成分(Bovine)核檢測試盒(PCR法)For-ML-pNA
18.75pg/ml羊源性成分(Ovine)核檢測試盒(PCR法)For-MAS-OH
46.9pg/ml雞源性成分(Chicken)核檢測試盒(PCR法)For-MA -OH
0.469ng/ml鴨源性成分(Duck)核檢測試盒(PCR法)For-AGSE-OH
0.191ng/ml豬源性成分(Porcine)核檢測試盒(PCR法)(Glu32)-Charybdotoxin
0.938ng/ml大豆內(nèi)源基因(Lectin)核檢測試盒(PCR法)Charybdotoxin,ChTX
37.5pg/ml人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試盒β -Casomorphin (1-4) amide (bovine) ,, Morphiceptin
HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞人白介素-5(IL-5)ELISA試盒阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基
人白介素-5(IL-5)ELISA試盒結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)
人白介素4(IL-4)ELISA試盒改良月桂基鹽胰蛋白胨湯(MLST)
人白介素4(IL-4)ELISA試盒萬古(改良月桂基鹽胰蛋白胨湯凍干配套試)
人白介素3(IL-3)ELISA試盒腦—心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基
人白介素3(IL-3)ELISA試盒TSA胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試盒緩沖蛋白胨水(緩沖胨水增菌液) (BPW)
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試盒結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試盒改良月桂基鹽胰蛋白月示湯(MLST)
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試盒腸道菌增菌湯(E E)
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好,;另外溫度對(duì)細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,,保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。