培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%,；北美胎牛血清(United States,，GIBCO，貨號16000-044),，15%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株,；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶,；(3)不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,；2、說明書及注意事項(xiàng),；3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,，如是新鮮細(xì)胞株,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,。如是凍存細(xì)胞,，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用。

細(xì)胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品,，由氮直液接拿出,，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,，也較少使用這種方式,，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,，很難說是細(xì)胞自身不行,，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞,、基因功能狀態(tài)影響很大,，也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時(shí)間也很難控制,，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,，QC通過后,，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐),。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，進(jìn)口來源,，保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí)，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

1.875ng/ml禽流感/新城疫病(AIV/NDV)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin Message Associated Peptide (1-41) amide

0.188ng/ml禽流感通用/H5亞型（AIV-U/AIV-H5）核檢測試盒 (熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide (rat)

0.094ng/ml禽流感病H5/H7亞型(AIV-H5/H7)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide(porcine)

0.094ng/ml禽流感病H5/H7/H9亞型(AIV-H5/H7/H9)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide (human)

0.938ng/ml禽流感病H5/H7/新城疫病(AIV-H5/H7/NDV)核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Arg3)-FMRFamide

0.938ng/ml禽流感H5-H7-H9與新城疫病（NDV）四重核檢測試盒（熒光-PCR法）(D-Phe4)-FMRFamide

0.188ng/ml禽流感病H3N2（AIV-H3N2）核檢測試盒（熒光-PCR法）(D-Met2)-FMRFamide

0.141ng/ml豬瘟病/豬藍(lán)耳病病通用型/高致病性豬藍(lán)耳病病(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Phe1)-FMRFamide

4.688pg/ml豬藍(lán)耳病病通用型/高致病性豬藍(lán)耳病病(PRRSV-U/PRRSV-M)核檢測試盒(熒光-PCR法)Molluscan Cardioexcitatory Neuropeptide

0.938ng/ml豬瘟病/豬藍(lán)耳病病通用型（CSFV/PRRSV-U)核檢測試盒(熒光-PCR法)FLRFamide
CHL倉鼠肺細(xì)胞人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試盒膽乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試盒DHL瓊脂(膽乳瓊脂)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試盒亞鉍瓊脂(BS)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試盒亞硒鹽增菌液(SF)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒亞硒鹽胱氨增菌液(SC)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒四磺鈉亮綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試盒四磺鈉煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試盒氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒麥康凱瓊脂NO.3

人管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒弧菌顯色培養(yǎng)基選擇性添加凍干試