詳細(xì)介紹
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶,。一般不推薦這種,,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,,還是復(fù)蘇沒操作好,;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,,也不是細(xì)胞儲存的方式,,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量,;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(順豐),。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,,排除復(fù)蘇造成影響,,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(順豐),。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,,保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株,;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶,;(3)不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1,、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基,;2、說明書及注意事項,;3,、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,,如是新鮮細(xì)胞株,,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作,。如是凍存細(xì)胞,,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇,。該細(xì)胞只可用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×105/瓶 | CS-X3218 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,,可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),,85%,;北美胎牛血清(United States,,GIBCO,,貨號16000-044),15%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制,,同時,可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片,、縮時電影、電視等多種手段,。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,,如細(xì)胞學(xué),、免疫學(xué)、腫瘤學(xué),、生物化學(xué)、遺傳學(xué),、分子生物學(xué)等,; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量,、同一時期,、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象,。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
18.75ng/ml鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核檢測試盒(熒光-PCR法)Somatostatin-28 (1-12)
9.375pg/ml新孢子蟲(Ne)核檢測試盒(熒光-PCR法)Somatostatin-28 (1-14)
18.75pg/ml牛巴氏桿菌(PB)核檢測試盒(熒光-PCR法)(YCFAWKTFC)
28.125pg/ml伊氏錐蟲(TE)核檢測試盒(熒光-PCR法)Vapreotide, RC-160
0.094ng/ml兔黏液瘤?。≧MV)核檢測試盒(熒光-PCR法)Synaptobrevin-2 (73-79)(human, bovine, mouse, rat)
0.578ng/ml野兔熱(Tul)核檢測試盒(熒光-PCR法)Syndyphalin SD-33
0.938mIU/ml馬皰疹病4型(EHV-IV)核檢測試盒(熒光-PCR法)Iberiotoxin
0.938mIU/ml羊衣原體Kaliotoxin
9.375pg/ml牛支原體(MYPB)核檢測試盒(熒光-PCR法)Margatoxin
9.375pg/ml牛細(xì)小病(BPV)核檢測試盒(熒光-PCR法)Noxiustoxin
H9C2大鼠心肌細(xì)胞人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試盒順-6-十八碳烯酯
人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試盒順烯二二酯
人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試盒順烯二二酯
人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試盒順式-11-二十碳烯酯
人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試盒 順式-9-十八碳烯酯
人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試盒 四(十八)季戊四酯
人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試盒 鈦酯
人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試盒 鈦四酯
人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試盒 鈦正四酯
人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試盒 碳烯酯