詳細(xì)介紹
公司采用全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,,高效性,,*抗體,吸附均勻,、吸附性好,,回收利用率高、可靠性強,,無效包退包換,,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,,質(zhì)量可靠,。
人蛋白激酶CELISA試劑盒英文名稱:PKC ELISA Kit產(chǎn)品別名:人PKC elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱:人蛋白激酶CELISA試劑盒
英文名稱: PKC ELISA Kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
標(biāo)本的采集與保存:
1,、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2,、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3,、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿),;
2) 可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,,該過程需在冰上進(jìn)行(有條件實驗室可選用機器勻漿),;得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次),。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,,留取上清即可檢測。
4,、其它生物標(biāo)本:請1000×g 離心20 分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),,已獲得國家承認(rèn)的“三證”,,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,,再進(jìn)行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,;
③檢測抗原時,,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本,;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染,、保存時間過長或凝固不全等,;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,,以防溶血,;收集標(biāo)本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存,;保存時間不宜過久,,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,,并放入37℃水中1 h,,待充分凝固后再離心分離血清,。
以下是人蛋白激酶CELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
氧化釕人C9orf140蛋白(Protein C9orf140)ELISA試盒
苯-2-磺酸鈉ELISA Kit for Human Protein C9orf140
六水硫酸鎳人細(xì)胞周期蛋白-依的激酶12(CDK12)ELISA試盒
3--2,4,5-三氟苯酸ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 12
三基硅醇鉀人OX-2膜糖蛋白(OX2G)ELISA試盒
3-基黃嘌呤ELISA Kit for Human OX-2 membrane glycoprotein
5-氟色胺人酸酶結(jié)合蛋白1(CABIN1)ELISA試盒
N-Boc-L-叔亮酸ELISA Kit for Human Calcineurin-binding protein cabin-1
[(二氟基)磺酰基]苯人細(xì)胞色素P450 2C19(CYP2C19)ELISA試盒
3,4 -二苯基肼ELISA Kit for Human Cytochrome P450 2C19
人蛋白激酶CELISA試劑盒5--3-基-1H-吲唑人不典型蛋白C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106)ELISA試盒
2,4-二氧基苯ELISA Kit for Human Uncharacterized protein C1orf106
2--5-苯胺人DNA導(dǎo)向RNA聚合酶III亞基RPC9(CRCP)ELISA試盒
2-金剛烷-5-酸ELISA Kit for Human DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC9
3--1,2-二基苯人組織蛋白酶C(CTS-C)ELISA試盒Human BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA Kit
Human BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA KitNIMP/RTN4IP1 NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體
TMEM173 跨膜蛋白173抗體
TMEM147 跨膜蛋白147抗體
PANK1 泛酸激酶1抗體
PANK2 泛酸激酶2抗體
BT549(乳腺管癌細(xì)胞)
BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)
BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)
C127(乳腺腫瘤細(xì)胞)
C6(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
ELISA 試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。