詳細(xì)介紹
?ELISA 試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),,觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
人突觸泡蛋白抗體英文名稱:SYP-Ab ELISA kit產(chǎn)品別名:人SYP-Ab elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱:人突觸泡蛋白抗體ELISA試劑盒
英文名稱: SYP-Ab ELISA kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
標(biāo)本的采集與保存:
1,、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜,,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2,、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3,、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,,該過程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫,;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次),。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測,。
4,、其它生物標(biāo)本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),,我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證”,,每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑,。我司的試劑,值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求,。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本,;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血,、細(xì)菌污染,、保存時(shí)間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管,,經(jīng)檢測后再低溫凍存,;保存時(shí)間不宜過久,檢測時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本,;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清,。
公司采用全是進(jìn)口原材料研,,發(fā)靈敏性高,,高效性,,*抗體,吸附均勻,、吸附性好,,回收利用率高、可靠性強(qiáng),,無效包退包換,,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,,質(zhì)量可靠,。
以下是人突觸泡蛋白抗體ELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
Histone H3(抗人;抗兔,;抗小鼠,;抗大鼠)Anti-IL-18R alpha/CD218a 白細(xì)胞介素-18受體α鏈抗體
NF kappa B p65(抗人;抗兔,;抗小鼠,;抗大鼠)IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原
NF kappa B p50(抗人;抗兔,;抗小鼠,;抗大鼠)IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原
Rho(-A.-B.-C)(抗人;抗兔;抗小鼠,;抗大鼠)IL-2 (Interleukin-2)Mouse,、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)
TRAIL(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-2 (Interleukin-2)Human IL-2抗原(人)
EGFR(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原
IGF-I(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗原
IGF-II(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原
PDGFR-alpha(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原
PDGFR-beta(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-6 (Interleukin-6) Human 白介素6
人突觸泡蛋白抗體ELISA試劑盒 Androgen Receptor(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原
Estrogen Receptor beta(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白細(xì)胞介素6受體α抗原
Insulin(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)gp130/IL-6R 白介素-6受體抗原
Insulin R-alpha(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)IL-7Ra/CD127 peptide 白細(xì)胞介素-7受體a抗原
FSH-beta(抗人,;抗兔,;抗小鼠;抗大鼠)ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗原Bovine IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit
Bovine IL-6(Interleukin 6) ELISA Kitphospho-delta 1 Catenin (Ser268)英文名稱:Bub3人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)免疫試盒
英文名稱:C13orf38核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1體
TRIM7英文名稱:phospho-RGS19(Ser24)神經(jīng)元,,肌肉特異性烯醇化酶抗體
phospho-delta 1 Catenin (Thr310)英文名稱:BHLHB9/p60TRP人血影蛋白(spectrin)免疫試盒
英文名稱:C14ORF140心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5體
RNF89英文名稱:phospho-RGS19(Ser151)內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體
phospho-delta 1 Catenin (Thr916)英文名稱:BLMH人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試盒
英文名稱:CHAC2指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白體
TGM2 英文名稱:phospho-RPS6KA1(Ser352)發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(醇致畸因子)