小鼠糖類抗原199英文名稱：Mouse Carbonhydrate Antigen CA199 ELISA Kit產品別名：小鼠CA199 elisa試劑盒用于測定血清,，血漿及相關液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,。公司采用全是進口原材料研,，發(fā)靈敏性高，高效性,，*抗體,，吸附均勻、吸附性好,，回收利用率高,、可靠性強，無效包退包換,，公司提供免費代測服務,，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠,。

產品名稱：小鼠糖類抗原199ELISA試劑盒
英文名稱： Mouse Carbonhydrate Antigen CA199 ELISA Kit

規(guī)格 ：48T/96T
主要成分：酶標板,試劑,標準品等,。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物,。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..
標本的采集與保存：
1,、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘,，取上清即
可,，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融,。
2,、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,，
取上清即可檢測,，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融,。
3,、組織勻漿：
1） 取適量組織塊，于預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液,，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）,；
2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）,；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復凍融法可重復2 次）,。
3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,，留取上清即可檢測。
4,、其它生物標本：請1000×g 離心20 分鐘,，取上清即可檢測，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,，但應避免反復凍融,。
?ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時,，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性,。有時本底較高,，說明有非特異性反應，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。 
     2. 在ELISA中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體,，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被,，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性,，據此判明其吸附性能是否良好,。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進行包被后,，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度,。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全,、有明顯地顯色反應，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用,，應注意防護。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,，應加入強酸或強堿以終止反應,。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入 ,。


試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,，我司嚴格按照進行生產,，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的生產批號,，只要客戶提前下單,，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑,。我司的試劑,，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20-30 min后,，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡,，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,，以滿足后面的測定需求。
二,、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子,、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體,、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG,；
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理,；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解,；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血,、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作,，采集的血液勿用力震蕩,，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經檢測后再低溫凍存,；保存時間不宜過久,，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,，并放入37℃水中1 h,，待充分凝固后再離心分離血清。
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