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植物吲哚乙酸氧化酶（IAAO）elisa試劑盒使用方法
閱讀：407 發(fā)布時間：2020-7-17植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）elisa試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用
實驗原理
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度,。
樣本處理要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應再次離心。
2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。
5.組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）ELISA試劑盒組成注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值,。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,，已經(jīng)變藍的底物液不能使用,。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性,。
9. 不能使用過期產(chǎn)品,。
10. 實驗還需要酶標儀（450nm），37℃恒溫箱,，高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水,。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。
13. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
14.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能人上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.
15.不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 品種齊全,、質(zhì)量可靠,、靈敏度高、特異性強,、重復性好,、操作簡便、穩(wěn)定性好,。
2. 同城（上海）需要代測可免費上門取樣,，享免費送貨上門服務(wù)。
3. 訂購ELISA試劑盒可提供免費代測服務(wù),。
4. 現(xiàn)貨直發(fā),，順豐速運，全國包郵 ,。